HL-1

A HL-1 egy felnőtt egér pitvari szívizomsejtjeiből származó szívizomsejt-vonal. Ez a sejtvonal abban az értelemben egyedülálló, hogy hosszú távú tenyésztés során is megőrzi összehúzódási képességét és differenciált szívfenotípusát, ami felbecsülhetetlen értékű modellé teszi a kardiovaszkuláris kutatások számára. Az HL-1 sejteket széles körben használják a szívfiziológiára, az elektrofiziológiára és a farmakológiára összpontosító kutatásokban. Az a képességük, hogy spontán és indukálható összehúzódásokat hajtsanak végre, lehetővé teszi a kutatók számára, hogy vizsgálják a szívizom működésének, a betegségeknek és a terápiás szerekre adott reakcióknak az alapjául szolgáló molekuláris mechanizmusokat.

Az HL-1 sejtek a szívizomsejtekre jellemző tulajdonságokat mutatnak, ideértve a szívspecifikus markerek – például a troponin, a miozin és a konnexin 43 – expresszióját is. Különböző fiziológiai és farmakológiai ingerekre reagálnak, ami lehetővé teszi a szív jelátviteli útvonalainak, az ioncsatornák működésének, valamint a gyógyszerek szívsejtekre gyakorolt hatásainak részletes vizsgálatát. Ez a sejtvonal különösen értékes a szívritmuszavarok, a hipertrófia és más szívbetegségek modellezéséhez. Ezen felül a HL-1 sejteket nagy áteresztőképességű gyógyszerszűrő vizsgálatokban is alkalmazzák olyan vegyületek azonosítására, amelyek modulálják a szívműködést, ami elengedhetetlen a szív- és érrendszeri betegségek új kezelési módszereinek kifejlesztéséhez.

Claycomb-tápközeg, 2 mM glutamin, 10% FBS, 0,1 mM norepinefrin L-aszkorbinsavban (Ezt a terméket nem forgalmazzuk)

Készítsen elő 0,1 mM norepinefrint L-aszkorbinsavban:

Készítsen 100-szoros koncentrációjú törzsoldatot = 10 mM norepinefrin.

1. Készítsen 30 mM-es L-aszkorbinsav-oldatot (50 mL)

2. Adjon hozzá 160 mg norepinefrint az aszkorbinsav-oldathoz (50 mL) = 10 mM norepinefrin

3. Szteril módon szűrje át az oldatot egy 0,2 µm-es szűrőpatronon.

4. Töltsön 1 mL-es alikvotokat a 100-szeres norepinefrin-tartalékoldatból steril fiolákba, és tárolja −20 °C-on. Csomagolja be alumíniumfóliába; fénytől védeni kell. Az oldat −20 °C-on körülbelül 1 hónapig stabil.

5. Adjunk 1 ml-t ebből az oldatból 100 ml Claycomb-tápközeghez. A tápközeg csak 1 hónapig stabil.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

A sejtkultúra-palackokat fibronektinnel és zselatinnal kell bevonni. 25 µg fibronektint, amelyet 2 ml 0,02%-os vizes zselatinoldatban oldottunk fel, egy T25-ös palackba helyezünk, és egy éjszakán át 37 °C-on inkubáljuk.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban