HL-1

HL-1 je buněčná linie srdečního svalu odvozená z atriálních kardiomyocytů dospělé myši. Tato buněčná linie je jedinečná v tom, že si zachovává schopnost kontrakce a udržuje diferencovaný srdeční fenotyp během dlouhodobé kultivace, což z ní činí neocenitelný model pro kardiovaskulární výzkum. Buňky HL-1 jsou široce využívány ve studiích zaměřených na fyziologii srdce, elektrofyziologii a farmakologii. Jejich schopnost spontánních a indukovatelných kontrakcí umožňuje výzkumníkům zkoumat molekulární mechanismy, které jsou základem funkce srdečního svalu, onemocnění a reakce na terapeutické látky.

Buňky HL-1 vykazují vlastnosti typické pro buňky srdečního svalu, včetně exprese pro srdce specifických markerů, jako jsou troponin, myosin a konexin 43. Jsou citlivé na různé fyziologické a farmakologické podněty, což umožňuje detailní studium přenosových cest srdečních signálů, funkce iontových kanálů a účinků léčiv na srdeční buňky. Tato buněčná linie je zvláště cenná pro modelování srdečních arytmií, hypertrofie a dalších srdečních patologií. Kromě toho se buňky HL-1 používají ve vysoce výkonných testech screeningu léčiv zaměřených na identifikaci sloučenin, které modulují srdeční funkci, což je zásadní pro vývoj nových způsobů léčby kardiovaskulárních onemocnění.

Claycombovo médium, 2 mM glutaminu, 10 % FBS, 0,1 mM norepinefrinu v kyselině L-askorbové (neprodáváme)

Připravte 0,1 mM norepinefrinu v kyselině L-askorbové:

Připravte 100násobný zásobní roztok = 10 mM norepinefrinu.

1. Připravte 30 mM roztok kyseliny L-askorbové (50 ml)

2. Do roztoku kyseliny askorbové (50 ml) přidejte 160 mg norepinefrinu = 10 mM norepinefrinu

3. Roztok sterilně přefiltrujte přes 0,2-µm filtrační vložku.

4. Naplňte 1 ml alikvotů 100násobného zásobního roztoku norepinefrinu do sterilních lahviček a skladujte při teplotě −20 °C. Zabalte do hliníkové fólie; musí být chráněno před světlem. Roztok je stabilní přibližně 1 měsíc při teplotě −20 °C.

5. Do 100 ml Claycombova média přidejte 1 ml tohoto roztoku. Médium je stabilní pouze po dobu 1 měsíce.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

Lahve pro buněčné kultury musí být potaženy fibronektinem a želatinou. Do lahve T25 se přidá 25 µg fibronektinu rozpuštěného ve 2 ml 0,02% roztoku želatiny ve vodě a inkubuje se přes noc při teplotě 37 °C.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení