Gå direkte til indholdet
HL-1
Væv
Hjerte, venstre forkammer
Sygdom
Normal forkammer-kardiomyocyt (immortaliseret med SV40-stort T-antigen via AT-1-stammen; kontraherer spontant; ikke-tumorigen ved normal anvendelse)
Synonymer
HL1, HL-1 F2 P76

Dokumenter

HL-1

Cell line · Varenummer 305264

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HL-1 er en hjertemuskelcellelinje, der stammer fra forkammerkardiomyocytter fra en voksen mus. Denne cellelinje er unik, idet den bevarer evnen til at trække sig sammen og opretholde en differentieret hjertefenotype under langvarig dyrkning, hvilket gør den til en uvurderlig model for kardiovaskulær forskning. HL-1-celler anvendes i vid udstrækning i studier med fokus på hjertefysiologi, elektrofysiologi og farmakologi. Deres evne til at gennemgå spontane og inducerbare sammentrækninger giver forskerne mulighed for at undersøge de molekylære mekanismer, der ligger til grund for hjertemuskelfunktion, sygdom og respons på terapeutiske midler.

HL-1-celler udviser egenskaber, der er typiske for hjertemuskelceller, herunder ekspression af hjertespecifikke markører såsom troponin, myosin og connexin 43. De reagerer på forskellige fysiologiske og farmakologiske stimuli, hvilket muliggør detaljerede undersøgelser af hjertets signaltransduktionsveje, ionkanalfunktion og lægemidlers virkning på hjerteceller. Denne cellelinje er særligt værdifuld til modellering af hjertearytmier, hypertrofi og andre hjertepatologier. Derudover anvendes HL-1-celler i højkapacitets-lægemiddelscreeningsforsøg med det formål at identificere forbindelser, der modulerer hjertefunktionen, hvilket er afgørende for udviklingen af nye behandlinger mod hjerte-kar-sygdomme.

Væv
Hjerte, venstre forkammer
Sygdom
Normal forkammer-kardiomyocyt (immortaliseret med SV40-stort T-antigen via AT-1-stammen; kontraherer spontant; ikke-tumorigen ved normal anvendelse)
Anvendelser
Hjertefysiologi og elektrofysiologi; kardiomyocytbiologi; modellering af hjertearytmier; ionkanalfunktion (IKr, INa, ICaL); hjertehypertrofi og remodellering; hjerteiskæmi/reperfusionsskade; screening for lægemiddelkardiotoksicitet; connexin43 og gap junction-biologi; atriespecifik genekspression (ANF, α-MHC, α-aktin); analyser af spontan kontraktilitet; højkapacitetsscreening af hjerteaktiva; elektrofysiologi ved hjælp af multi-elektrode-array (MEA)
Synonymer
  • HL1
  • HL-1 F2 P76

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Kardiomyocytlignende
Celletype
Kardiomyocyt
Fordoblingstid
ca. 24 til 36 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HL-1 (Cytion-katalognummer 305264)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0303

05Udtryk og modtagelighed

Vira
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium

Claycomb-medium, 2 mM glutamin, 10 % FBS, 0,1 mM noradrenalin i L-ascorbinsyre (Vi forhandler ikke dette produkt)

Fremstil 0,1 mM noradrenalin i L-ascorbinsyre:

Fremstil en 100-foldig stamopløsning = 10 mM noradrenalin.

1. Fremstil en 30 mM L-ascorbinsyreopløsning (50 mL)

2. Tilsæt 160 mg noradrenalin til ascorbinsyreopløsningen (50 mL) = 10 mM noradrenalin

3. Filtrer opløsningen sterilt gennem et 0,2 µm filterpatron.

4. Hæld 1-mL-aliquoter af den 100-foldige norepinefrin-stamopløsning i sterile hætteglas og opbevar ved −20 °C. Indpak i aluminiumsfolie; skal beskyttes mod lys. Opløsningen er stabil i ca. 1 måned ved −20 °C.

5. Tilsæt 1 mL af denne opløsning til 100 mL Claycomb-medium. Mediet er kun stabilt i 1 måned.

Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Tilføj 10 % FBS, 2 mM glutamin og 0,1 mM noradrenalin til mediet i L-ascorbinsyre
Dissociationsreagens
Accutase
Belægning af kolber

Cellekulturflaskerne skal belægges med fibronektin og gelatine. 25 µg fibronektin, opløst i 2 ml 0,02 % gelatine i vand, hældes i en T25-flaske og inkuberes natten over ved 37 °C

Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Opdelingsforhold
1 til 3
Såtæthed
2 til 4 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
Dagligt (Claycomb Medium udskiftes hver 24. time for at opretholde den kontraktile fænotype)
Genopretning efter optøning
Efter optøning udplades cellerne på kolber, der er belagt med fibronektin og gelatine (forbelæg med 12,5 µg/ml fibronektin og 0,02 % gelatine; inkuber ved 37 °C i mindst 1 time, sug væsken fra inden udpladning). Lad cellerne hæfte og komme sig i 24–48 timer, før det første medieskift foretages. Tilfør derefter dagligt suppleret Claycomb-medium.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
C3HeB/FeJ transgen
Donorens alder
Uspecificeret
Etnisk tilhørsforhold
Ikke relevant (C3HeB/FeJ-transgen musestamme; opdrættet i Q)

10Produktoplysninger

Sammensætningstabel