HL-1

A HL-1 é uma linha celular de músculo cardíaco derivada dos cardiomiócitos atriais de um rato adulto. Esta linha celular é única, na medida em que mantém a capacidade de se contrair e de preservar um fenótipo cardíaco diferenciado ao longo de uma cultura a longo prazo, tornando-a um modelo inestimável para a investigação cardiovascular. As células HL-1 são amplamente utilizadas em estudos centrados na fisiologia cardíaca, eletrofisiologia e farmacologia. A sua capacidade de sofrer contrações espontâneas e induzíveis permite aos investigadores estudar os mecanismos moleculares subjacentes à função do músculo cardíaco, às doenças cardíacas e à resposta a agentes terapêuticos.

As células HL-1 apresentam características típicas das células do músculo cardíaco, incluindo a expressão de marcadores específicos do coração, tais como a troponina, a miosina e a conexina 43. São sensíveis a vários estímulos fisiológicos e farmacológicos, permitindo estudos detalhados das vias de transdução de sinais cardíacos, da função dos canais iônicos e dos efeitos dos fármacos nas células cardíacas. Esta linha celular é particularmente valiosa para a modelação de arritmias cardíacas, hipertrofia e outras patologias cardíacas. Além disso, as células HL-1 são utilizadas em ensaios de triagem de fármacos de alto rendimento, com o objetivo de identificar compostos que modulam a função cardíaca, o que é crucial para o desenvolvimento de novos tratamentos para doenças cardiovasculares.

Meio Claycomb, 2 mM de glutamina, 10% de FBS, 0,1 mM de norepinefrina em ácido L-ascórbico (Não comercializamos)

Prepare 0,1 mM de norepinefrina em ácido L-ascórbico:

Prepare uma solução-mãe 100 vezes mais concentrada = 10 mM de norepinefrina.

1. Prepare uma solução de ácido L-ascórbico a 30 mM (50 mL)

2. Adicione 160 mg de norepinefrina à solução de ácido ascórbico (50 mL) = 10 mM de norepinefrina

3. Filtre a solução de forma estéril através de um cartucho filtrante de 0,2 µm.

4. Encha alíquotas de 1 mL da solução-mãe de norepinefrina 100 vezes concentrada em frascos estéreis e armazene a −20 °C. Envolva em papel de alumínio; deve ser protegida da luz. A solução é estável durante aproximadamente 1 mês a −20 °C.

5. Adicione 1 mL desta solução a 100 mL de meio Claycomb. O meio é estável apenas durante 1 mês.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

Os frascos de cultura celular devem ser revestidos com fibronectina e gelatina. Colocam-se 25 µg de fibronectina, dissolvidos em 2 ml de gelatina a 0,02% em água, num frasco T25 e incubam-se durante a noite a 37 °C

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia