Gå direkt till innehållet
HL-1
Vävnad
Hjärta, vänster förmak
Sjukdom
Normal förmakskardiomyocyt (immortaliserad med SV40:s stora T-antigen via AT-1-linjen; kontraherar spontant; icke-tumörbildande vid normal användning)
Synonymer
HL1, HL-1 F2 P76

HL-1

Cell line · Produktnummer 305264

€800.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

HL-1 är en hjärtmuskelcellinje som härrör från förmakskardiomyocyterna hos en vuxen mus. Denna cellinje är unik genom att den behåller förmågan att kontrahera och upprätthålla en differentierad hjärtfenotyp under långvarig odling, vilket gör den till en ovärderlig modell för kardiovaskulär forskning. HL-1-celler används ofta i studier som fokuserar på hjärtfysiologi, elektrofysiologi och farmakologi. Deras förmåga att genomgå spontana och inducerbara sammandragningar gör det möjligt för forskare att undersöka de molekylära mekanismer som ligger bakom hjärtmuskelfunktion, sjukdom och respons på terapeutiska medel.

HL-1-celler uppvisar egenskaper som är typiska för hjärtmuskelceller, bland annat uttryck av hjärtspecifika markörer som troponin, myosin och connexin 43. De reagerar på olika fysiologiska och farmakologiska stimuli, vilket möjliggör detaljerade studier av hjärtats signaltransduktionsvägar, jonkanalers funktion och läkemedelseffekter på hjärtceller. Denna cellinje är särskilt värdefull för modellering av hjärtarytmier, hypertrofi och andra hjärtpatologier. HL-1-celler används dessutom i högkapacitetsscreening av läkemedel för att identifiera substanser som modulerar hjärtfunktionen, vilket är avgörande för utvecklingen av nya behandlingar mot hjärt-kärlsjukdomar.

Vävnad
Hjärta, vänster förmak
Sjukdom
Normal förmakskardiomyocyt (immortaliserad med SV40:s stora T-antigen via AT-1-linjen; kontraherar spontant; icke-tumörbildande vid normal användning)
Ansökningar
Hjärtfysiologi och elektrofysiologi; hjärtmuskelcellbiologi; modellering av hjärtarytmier; jonkanalfunktion (IKr, INa, ICaL); hjärthypertrofi och ombyggnad; hjärtiskemi/reperfusionsskada; screening av läkemedelskardiotoxicitet; connexin43 och gap junction-biologi; förmaksspecifik genuttryck (ANF, α-MHC, α-aktin); analyser av spontan kontraktilitet; högkapacitetsscreening av hjärtläkemedel; elektrofysiologi med multielektrodmatris (MEA)
Synonymer
  • HL1
  • HL-1 F2 P76

02Klassificering

Organism
Mus
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Kardiomyocytliknande
Celltyp
Kardiomyocyt
Fördubblingstid
ca 24 till 36 timmar

04Identifierare

Källa
HL-1 (Cytion katalognummer 305264)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0303

05Uttryck och mottaglighet

Virus
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Hantering och odling

Odlingsmedium

Claycomb-medium, 2 mM glutamin, 10 % FBS, 0,1 mM noradrenalin i L-askorbinsyra (Vi säljer inte detta)

Bered 0,1 mM noradrenalin i L-askorbinsyra:

Bered en 100-faldig stamlösning = 10 mM noradrenalin.

1. Bered en 30 mM L-askorbinsyralösning (50 mL)

2. Tillsätt 160 mg noradrenalin till askorbinsyralösningen (50 ml) = 10 mM noradrenalin

3. Filtrera lösningen sterilt genom en 0,2 µm filterpatron.

4. Fyll 1 ml-aliquoter av den 100-faldiga norepinefrin-stamlösningen i sterila ampuller och förvara vid −20 °C. Förpacka i aluminiumfolie; måste skyddas mot ljus. Lösningen är stabil i cirka 1 månad vid −20 °C.

5. Tillsätt 1 ml av denna lösning till 100 ml Claycomb-medium. Mediet är endast stabilt i 1 månad.

Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Tillsätt 10 % FBS, 2 mM glutamin och 0,1 mM noradrenalin i L-askorbinsyra till odlingsmediet
Dissociationsmedel
Accutase
Beläggning av kolvar

Cellodlingsflaskorna måste beläggas med fibronektin och gelatin. 25 µg fibronektin, upplöst i 2 ml 0,02-procentig gelatinlösning i vatten, hälls i en T25-flaska och inkuberas över natten vid 37 °C.

Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Uppdelningsförhållande
1 till 3
Såtäthet
2 till 4 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
Dagligen (Claycomb Medium byts ut var 24:e timme för att upprätthålla den kontraktila fenotypen)
Återhämtning efter upptining
Efter upptining ska cellerna odlas i kolvar belagda med fibronektin och gelatin (förbelägg med 12,5 µg/ml fibronektin och 0,02 % gelatin; inkubera vid 37 °C i minst 1 timme, suga bort vätskan innan utsäde). Låt cellerna fästa och återhämta sig i 24–48 timmar innan det första mediebytet. Tillsätt därefter dagligen Claycomb-medium med tillskott.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Ras / underart
C3HeB/FeJ transgena
Donatorns ålder
Ospecificerad
Etnicitet
Ej tillämpligt (transgen musstam C3HeB/FeJ; uppfödd i Q)

10Produktinformation

Sammansättningstabell