Gå til innholdet
HL-1
Vev
Hjerte, venstre forkammer
Sykdom
Normal forkammerkardiomyocytt (immortaliseret med SV40-stort T-antigen via AT-1-linjen; med spontan sammentrekning; ikke-tumorogen ved normal bruk)
Synonymer
HL1, HL-1 F2 P76

Dokumenter

HL-1

Cell line · Produktnummer 305264

€800.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HL-1 er en hjertemuskelcellelinje som er avledet fra atriale kardiomyocytter fra en voksen mus. Denne cellelinjen er unik ved at den beholder evnen til å trekke seg sammen og opprettholde en differensiert hjertefenotype over lang tids dyrking, noe som gjør den til en uvurderlig modell for kardiovaskulær forskning. HL-1-celler er mye brukt i studier med fokus på hjertefysiologi, elektrofysiologi og farmakologi. Cellenes evne til å gjennomgå spontane og induserbare sammentrekninger gjør det mulig for forskere å undersøke de molekylære mekanismene som ligger til grunn for hjertemuskelfunksjon, sykdom og respons på terapeutiske midler.

HL-1-celler har egenskaper som er typiske for hjertemuskelceller, blant annet uttrykk av hjertespesifikke markører som troponin, myosin og connexin 43. De reagerer på ulike fysiologiske og farmakologiske stimuli, noe som muliggjør detaljerte studier av hjertets signaltransduksjonsveier, ionekanalfunksjon og effekten av legemidler på hjerteceller. Denne cellelinjen er spesielt verdifull for modellering av hjertearytmier, hypertrofi og andre hjertepatologier. I tillegg brukes HL-1-celler i høykapasitets screeninganalyser for å identifisere stoffer som modulerer hjertefunksjonen, noe som er avgjørende for utviklingen av nye behandlinger for hjerte- og karsykdommer.

Vev
Hjerte, venstre forkammer
Sykdom
Normal forkammerkardiomyocytt (immortaliseret med SV40-stort T-antigen via AT-1-linjen; med spontan sammentrekning; ikke-tumorogen ved normal bruk)
Søknader
Hjertefysiologi og elektrofysiologi; kardiomyocyttbiologi; modellering av hjertearytmier; ionekanalfunksjon (IKr, INa, ICaL); hjertehypertrofi og -remodellering; hjerteiskemi/reperfusjonsskade; screening av kardiotoksiske legemidler; connexin43 og gap junction-biologi; atriespesifikk genuttrykk (ANF, α-MHC, α-aktin); analyser av spontan kontraktilitet; høykapasitets screening av hjertemedisiner; elektrofysiologi ved hjelp av multielektrodearray (MEA)
Synonymer
  • HL1
  • HL-1 F2 P76

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Kardiomyocyttlignende
Celletype
Kardiomyocytt
Fordoblingstid
ca. 24 til 36 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HL-1 (Cytion katalognummer 305264)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0303

05Uttrykk og mottakelighet

Virus
Transformant: Simian virus 40 (SV40)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium

Claycomb-medium, 2 mM glutamin, 10 % FBS, 0,1 mM noradrenalin i L-askorbinsyre (Vi selger ikke dette)

Tilbered 0,1 mM noradrenalin i L-askorbinsyre:

Tilbered en 100-foldig stamløsning = 10 mM noradrenalin.

1. Tilbered en 30 mM L-askorbinsyreoppløsning (50 mL)

2. Tilsett 160 mg noradrenalin til askorbinsyreoppløsningen (50 ml) = 10 mM noradrenalin

3. Filtrer løsningen sterilt gjennom en 0,2 µm filterpatron.

4. Fyll 1-mL-aliquoter av den 100-foldige norepinefrin-stamløsningen i sterile hetteglass og oppbevar ved −20 °C. Pakk inn i aluminiumsfolie; må beskyttes mot lys. Løsningen er stabil i ca. 1 måned ved −20 °C.

5. Tilsett 1 ml av denne løsningen til 100 ml Claycomb-medium. Mediet er kun stabilt i 1 måned.

Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Tilsett 10 % FBS, 2 mM glutamin og 0,1 mM noradrenalin i L-askorbinsyre til mediet
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Belegg på kolber

Cellekulturflaskene må belegges med fibronektin og gelatin. 25 µg fibronektin, oppløst i 2 ml 0,02 % gelatin i vann, helles i en T25-flaske og inkuberes over natten ved 37 °C

Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Oppdelingsforhold
1 til 3
Såtetthet
2 til 4 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
Daglig (Claycomb Medium skiftes ut hver 24. time for å opprettholde den kontraktile fenotypen)
Gjenoppretting etter tining
Etter tining skal cellene sås på kolber belagt med fibronektin og gelatin (forhåndsbelegg med 12,5 µg/ml fibronektin og 0,02 % gelatin; inkuber ved 37 °C i minst 1 time, sug ut væsken før såing). La cellene feste seg og komme seg i 24–48 timer før det første medieskiftet. Tilfør deretter daglig Claycomb-medium tilsatt næringsstoffer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
C3HeB/FeJ transgen
Donorens alder
Uspesifisert
Etnisitet
Ikke relevant (transgen musestamme C3HeB/FeJ; avlet i Q)

10Produktdetaljer

Sammensetningstabell