Skip to content
HL-1
Tissue
หัวใจ, หัวใจห้องบนซ้าย
Disease
เซลล์กล้ามเนื้อหัวใจห้องบนปกติ (SV40 large T antigen-ทำให้เป็นอมตะผ่านสายพันธุ์ AT-1; ทำงานหดตัวโดยอัตโนมัติ; ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกเมื่อใช้ตามมาตรฐาน)
Synonyms
HL1, HL-1 F2 P76

Documents

HL-1

Cell line · Product number 305264

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HL-1 เป็นสายพันธุ์เซลล์กล้ามเนื้อหัวใจที่ได้มาจากเซลล์กล้ามเนื้อหัวใจห้องบนของหนูโตเต็มวัย สายพันธุ์เซลล์นี้มีเอกลักษณ์เฉพาะตัวที่สามารถคงความสามารถในการหดตัวและรักษาลักษณะเฉพาะของหัวใจที่แตกต่างได้แม้ในระหว่างการเพาะเลี้ยงระยะยาว ทำให้เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการวิจัยด้านหัวใจและหลอดเลือด เซลล์ HL-1 ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการศึกษาที่มุ่งเน้นด้านสรีรวิทยาหัวใจ, อิเล็กโทรสรีรวิทยา, และเภสัชวิทยา ความสามารถในการหดตัวโดยธรรมชาติและหดตัวเมื่อถูกกระตุ้นของเซลล์เหล่านี้ช่วยให้นักวิจัยสามารถศึกษาเชิงลึกถึงกลไกระดับโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการทำงานของกล้ามเนื้อหัวใจ, โรคต่าง ๆ และการตอบสนองต่อสารบำบัดได้

เซลล์ HL-1 แสดงลักษณะเฉพาะของเซลล์กล้ามเนื้อหัวใจ รวมถึงการแสดงออกของตัวบ่งชี้เฉพาะของหัวใจ เช่น โทรโปนิน ไมโอซิน และคอนเน็กซิน 43 เซลล์เหล่านี้ตอบสนองต่อสิ่งกระตุ้นทางสรีรวิทยาและเภสัชวิทยาต่างๆ ทำให้สามารถศึกษาเส้นทางส่งสัญญาณในหัวใจ การทำงานของช่องไอออน และผลของยาต่อเซลล์หัวใจได้อย่างละเอียด สายเซลล์นี้มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการจำลองภาวะหัวใจเต้นผิดจังหวะ ภาวะหัวใจโต และพยาธิสภาพอื่น ๆ ของหัวใจ นอกจากนี้ เซลล์ HL-1 ยังถูกนำมาใช้ในการทดสอบคัดกรองยาแบบปริมาณสูง (high-throughput drug screening assays) เพื่อค้นหาสารประกอบที่สามารถปรับเปลี่ยนการทำงานของหัวใจ ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการพัฒนาวิธีการรักษาใหม่สำหรับโรคหัวใจและหลอดเลือด

Tissue
หัวใจ, หัวใจห้องบนซ้าย
Disease
เซลล์กล้ามเนื้อหัวใจห้องบนปกติ (SV40 large T antigen-ทำให้เป็นอมตะผ่านสายพันธุ์ AT-1; ทำงานหดตัวโดยอัตโนมัติ; ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกเมื่อใช้ตามมาตรฐาน)
Applications
สรีรวิทยาและไฟฟ้าสรีรวิทยาของหัวใจ; ชีววิทยาของเซลล์กล้ามเนื้อหัวใจ; การสร้างแบบจำลองภาวะหัวใจเต้นผิดจังหวะ; การทำงานของช่องไอออน (IKr, INa, ICaL); ภาวะหัวใจโตและการเปลี่ยนแปลงรูปร่างของหัวใจ; ภาวะขาดเลือด/การไหลเวียนกลับของเลือดในหัวใจ; การคัดกรองพิษต่อหัวใจจากยา; ชีววิทยาของคอนเน็กซิน43 และช่องเชื่อมระหว่างเซลล์; การแสดงออกของยีนเฉพาะในหัวใจห้องบน (ANF, α-MHC, α-actin); การทดสอบการหดตัวแบบทันที; การคัดกรองยาสำหรับหัวใจแบบปริมาณสูง; การศึกษาทางไฟฟ้าสรีรวิทยาด้วยระบบหลายอิเล็กโทรด (MEA)
Synonyms
  • HL1
  • HL-1 F2 P76

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายเซลล์กล้ามเนื้อหัวใจ
Cell type
เซลล์กล้ามเนื้อหัวใจ
Doubling time
ประมาณ 24 ถึง 36 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
HL-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305264)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0303

05Expression and susceptibility

Viruses
ทรานส์ฟอร์แมนท์: ไวรัสซิเมียน 40 (SV40)

06Handling and culture

Culture medium

สื่อ Claycomb, กลูตามีน 2 mM, FBS 10%, นอร์เอพิเนฟริน 0.1 mM ในกรดแอล-แอสคอร์บิก (เราไม่จำหน่าย)

เตรียมนอร์เอพิเนฟริน 0.1 mM ในกรดแอล-แอสคอร์บิก:

เตรียมสารละลายสต็อก 100 เท่า = 10 mM นอร์เอพิเนฟริน

1. เตรียมสารละลาย L-ascorbic acid 30 mM (50 mL)

2. เติมนอร์เอพิเนฟริน 160 มก. ลงในสารละลายกรดแอสคอร์บิก (50 มล.) = นอร์เอพิเนฟริน 10 mM

3. กรองสารละลายด้วยตลับกรองขนาด 0.2 µm ในสภาวะปลอดเชื้อ

4. แบ่งสารละลายสต็อกนอร์เอพิเนฟรินความเข้มข้น 100 เท่าเป็นส่วนละ 1 mL ลงในขวดแก้วปลอดเชื้อ และเก็บไว้ที่อุณหภูมิ −20 °C ห่อด้วยฟอยล์อลูมิเนียม; ต้องป้องกันไม่ให้สัมผัสกับแสง สารละลายนี้มีความเสถียรประมาณ 1 เดือนที่อุณหภูมิ −20 °C.

5. เติมสารละลายนี้ 1 mL ลงใน Claycomb medium 100 mL สารอาหารนี้มีความเสถียรเพียง 1 เดือนเท่านั้น

Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติม FBS 10%, กลูตามีน 2 mM และนอร์เอพิเนฟริน 0.1 mM ลงในกรดแอล-แอสคอร์บิก
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Flask coating

ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ต้องถูกเคลือบด้วยไฟโบรเนคตินและเจลาติน โดยนำไฟโบรเนคติน 25 µg ที่ละลายในเจลาติน 0.02% ในน้ำปริมาณ 2 ml ใส่ลงในขวด T25 แล้วนำไปบ่มไว้ที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลาหนึ่งคืน

Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Split ratio
1 ถึง 3
Seeding density
2 ถึง 4 x 104 เซลล์/ซม.
Fluid renewal
ทุกวัน (เปลี่ยน Claycomb Medium ทุก 24 ชั่วโมงเพื่อรักษาลักษณะการแสดงออกของการหดตัว)
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเลี้ยงเซลล์ลงบนขวดเพาะเลี้ยงที่เคลือบด้วยไฟโบรเนกติน/เจลาติน (เคลือบล่วงหน้าด้วยไฟโบรเนกติน 12.5 µg/ml และเจลาติน 0.02%; อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา ≥1 ชั่วโมง จากนั้นดูดสารเคลือบออกก่อนเพาะเลี้ยงเซลล์) กรุณาให้เวลา 24–48 ชั่วโมงสำหรับการยึดติดและการฟื้นตัว ก่อนการเปลี่ยนอาหารกลางครั้งแรก ให้อาหารทุกวันโดยใช้ Claycomb Medium ที่เสริมแล้วต่อไป
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
C3HeB/FeJ ทรานส์เจเนติก
Donor age
ไม่ระบุ
Ethnicity
ไม่เกี่ยวข้อง (สายพันธุ์หนูทรานส์เจนิก C3HeB/FeJ; เพาะพันธุ์ใน Q)

10Product details

Composition table