
- Tissue
- หัวใจ, หัวใจห้องบนซ้าย
- Disease
- เซลล์กล้ามเนื้อหัวใจห้องบนปกติ (SV40 large T antigen-ทำให้เป็นอมตะผ่านสายพันธุ์ AT-1; ทำงานหดตัวโดยอัตโนมัติ; ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกเมื่อใช้ตามมาตรฐาน)
- Synonyms
- HL1, HL-1 F2 P76
Documents
HL-1
Cell line · Product number 305264
Customization / Recommendations
- HL-1Cell line€800.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
HL-1 เป็นสายพันธุ์เซลล์กล้ามเนื้อหัวใจที่ได้มาจากเซลล์กล้ามเนื้อหัวใจห้องบนของหนูโตเต็มวัย สายพันธุ์เซลล์นี้มีเอกลักษณ์เฉพาะตัวที่สามารถคงความสามารถในการหดตัวและรักษาลักษณะเฉพาะของหัวใจที่แตกต่างได้แม้ในระหว่างการเพาะเลี้ยงระยะยาว ทำให้เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการวิจัยด้านหัวใจและหลอดเลือด เซลล์ HL-1 ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการศึกษาที่มุ่งเน้นด้านสรีรวิทยาหัวใจ, อิเล็กโทรสรีรวิทยา, และเภสัชวิทยา ความสามารถในการหดตัวโดยธรรมชาติและหดตัวเมื่อถูกกระตุ้นของเซลล์เหล่านี้ช่วยให้นักวิจัยสามารถศึกษาเชิงลึกถึงกลไกระดับโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการทำงานของกล้ามเนื้อหัวใจ, โรคต่าง ๆ และการตอบสนองต่อสารบำบัดได้
เซลล์ HL-1 แสดงลักษณะเฉพาะของเซลล์กล้ามเนื้อหัวใจ รวมถึงการแสดงออกของตัวบ่งชี้เฉพาะของหัวใจ เช่น โทรโปนิน ไมโอซิน และคอนเน็กซิน 43 เซลล์เหล่านี้ตอบสนองต่อสิ่งกระตุ้นทางสรีรวิทยาและเภสัชวิทยาต่างๆ ทำให้สามารถศึกษาเส้นทางส่งสัญญาณในหัวใจ การทำงานของช่องไอออน และผลของยาต่อเซลล์หัวใจได้อย่างละเอียด สายเซลล์นี้มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการจำลองภาวะหัวใจเต้นผิดจังหวะ ภาวะหัวใจโต และพยาธิสภาพอื่น ๆ ของหัวใจ นอกจากนี้ เซลล์ HL-1 ยังถูกนำมาใช้ในการทดสอบคัดกรองยาแบบปริมาณสูง (high-throughput drug screening assays) เพื่อค้นหาสารประกอบที่สามารถปรับเปลี่ยนการทำงานของหัวใจ ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการพัฒนาวิธีการรักษาใหม่สำหรับโรคหัวใจและหลอดเลือด
- Tissue
- หัวใจ, หัวใจห้องบนซ้าย
- Disease
- เซลล์กล้ามเนื้อหัวใจห้องบนปกติ (SV40 large T antigen-ทำให้เป็นอมตะผ่านสายพันธุ์ AT-1; ทำงานหดตัวโดยอัตโนมัติ; ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกเมื่อใช้ตามมาตรฐาน)
- Applications
- สรีรวิทยาและไฟฟ้าสรีรวิทยาของหัวใจ; ชีววิทยาของเซลล์กล้ามเนื้อหัวใจ; การสร้างแบบจำลองภาวะหัวใจเต้นผิดจังหวะ; การทำงานของช่องไอออน (IKr, INa, ICaL); ภาวะหัวใจโตและการเปลี่ยนแปลงรูปร่างของหัวใจ; ภาวะขาดเลือด/การไหลเวียนกลับของเลือดในหัวใจ; การคัดกรองพิษต่อหัวใจจากยา; ชีววิทยาของคอนเน็กซิน43 และช่องเชื่อมระหว่างเซลล์; การแสดงออกของยีนเฉพาะในหัวใจห้องบน (ANF, α-MHC, α-actin); การทดสอบการหดตัวแบบทันที; การคัดกรองยาสำหรับหัวใจแบบปริมาณสูง; การศึกษาทางไฟฟ้าสรีรวิทยาด้วยระบบหลายอิเล็กโทรด (MEA)
- Synonyms
- HL1
- HL-1 F2 P76
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- คล้ายเซลล์กล้ามเนื้อหัวใจ
- Cell type
- เซลล์กล้ามเนื้อหัวใจ
- Doubling time
- ประมาณ 24 ถึง 36 ชั่วโมง
04Identifiers
- Citation
- HL-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305264)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0303
05Expression and susceptibility
- Viruses
- ทรานส์ฟอร์แมนท์: ไวรัสซิเมียน 40 (SV40)
06Handling and culture
- Culture medium
สื่อ Claycomb, กลูตามีน 2 mM, FBS 10%, นอร์เอพิเนฟริน 0.1 mM ในกรดแอล-แอสคอร์บิก (เราไม่จำหน่าย)
เตรียมนอร์เอพิเนฟริน 0.1 mM ในกรดแอล-แอสคอร์บิก:
เตรียมสารละลายสต็อก 100 เท่า = 10 mM นอร์เอพิเนฟริน
1. เตรียมสารละลาย L-ascorbic acid 30 mM (50 mL)
2. เติมนอร์เอพิเนฟริน 160 มก. ลงในสารละลายกรดแอสคอร์บิก (50 มล.) = นอร์เอพิเนฟริน 10 mM
3. กรองสารละลายด้วยตลับกรองขนาด 0.2 µm ในสภาวะปลอดเชื้อ
4. แบ่งสารละลายสต็อกนอร์เอพิเนฟรินความเข้มข้น 100 เท่าเป็นส่วนละ 1 mL ลงในขวดแก้วปลอดเชื้อ และเก็บไว้ที่อุณหภูมิ −20 °C ห่อด้วยฟอยล์อลูมิเนียม; ต้องป้องกันไม่ให้สัมผัสกับแสง สารละลายนี้มีความเสถียรประมาณ 1 เดือนที่อุณหภูมิ −20 °C.
5. เติมสารละลายนี้ 1 mL ลงใน Claycomb medium 100 mL สารอาหารนี้มีความเสถียรเพียง 1 เดือนเท่านั้น
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติม FBS 10%, กลูตามีน 2 mM และนอร์เอพิเนฟริน 0.1 mM ลงในกรดแอล-แอสคอร์บิก
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Flask coating
ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ต้องถูกเคลือบด้วยไฟโบรเนคตินและเจลาติน โดยนำไฟโบรเนคติน 25 µg ที่ละลายในเจลาติน 0.02% ในน้ำปริมาณ 2 ml ใส่ลงในขวด T25 แล้วนำไปบ่มไว้ที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลาหนึ่งคืน
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Split ratio
- 1 ถึง 3
- Seeding density
- 2 ถึง 4 x 104 เซลล์/ซม.
- Fluid renewal
- ทุกวัน (เปลี่ยน Claycomb Medium ทุก 24 ชั่วโมงเพื่อรักษาลักษณะการแสดงออกของการหดตัว)
- Post-thaw recovery
- หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเลี้ยงเซลล์ลงบนขวดเพาะเลี้ยงที่เคลือบด้วยไฟโบรเนกติน/เจลาติน (เคลือบล่วงหน้าด้วยไฟโบรเนกติน 12.5 µg/ml และเจลาติน 0.02%; อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา ≥1 ชั่วโมง จากนั้นดูดสารเคลือบออกก่อนเพาะเลี้ยงเซลล์) กรุณาให้เวลา 24–48 ชั่วโมงสำหรับการยึดติดและการฟื้นตัว ก่อนการเปลี่ยนอาหารกลางครั้งแรก ให้อาหารทุกวันโดยใช้ Claycomb Medium ที่เสริมแล้วต่อไป
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Breed / subspecies
- C3HeB/FeJ ทรานส์เจเนติก
- Donor age
- ไม่ระบุ
- Ethnicity
- ไม่เกี่ยวข้อง (สายพันธุ์หนูทรานส์เจนิก C3HeB/FeJ; เพาะพันธุ์ใน Q)
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
10Product details
- Composition table