HL-1

HL-1 ir sirds muskuļu šūnu līnija, kas iegūta no pieaugušas peles priekškambaru kardiomiocītiem. Šī šūnu līnija ir unikāla ar to, ka ilgtermiņa kultivēšanas laikā tā saglabā spēju saraukties un uzturēt diferencētu sirds fenotipu, tādējādi kļūstot par nenovērtējamu modeli sirds un asinsvadu pētījumos. HL-1 šūnas plaši izmanto pētījumos, kas veltīti sirds fizioloģijai, elektrofizioloģijai un farmakoloģijai. To spēja veikt gan spontānas, gan inducējamas kontrakcijas ļauj pētniekiem izpētīt molekulāros mehānismus, kas ir pamatā sirds muskuļa darbībai, slimībām un reakcijai uz terapeitiskajiem līdzekļiem.

HL-1 šūnas izrāda sirds muskuļa šūnām raksturīgas īpašības, tostarp sirdij specifisku marķieru, piemēram, troponīna, miozīna un koneksīna 43, ekspresiju. Tās reaģē uz dažādiem fizioloģiskiem un farmakoloģiskiem stimuliem, ļaujot veikt detalizētus pētījumus par sirds signālu pārneses ceļiem, jonu kanālu funkciju un zāļu ietekmi uz sirds šūnām. Šī šūnu līnija ir īpaši vērtīga sirds aritmiju, hipertrofijas un citu sirds patoloģiju modelēšanai. Turklāt HL-1 šūnas tiek izmantotas augstas caurlaidspējas zāļu skrīninga testos, kuru mērķis ir identificēt savienojumus, kas modulē sirds funkciju, kas ir būtiski jaunu sirds un asinsvadu slimību ārstēšanas metožu izstrādē.

Claycomb barotne, 2 mM glutamīns, 10 % FBS, 0,1 mM norepinefrīns L-askorbīnskābē (mēs to nepārdodam)

Sagatavojiet 0,1 mM norepinefrīnu L-askorbīnskābē:

Sagatavojiet 100 reizes koncentrētāku pamatšķīdumu = 10 mM norepinefrīns.

1. Pagatavojiet 30 mM L-askorbīnskābes šķīdumu (50 mL)

2. Pievienojiet 160 mg norepinefrīna askorbīnskābes šķīdumam (50 ml) = 10 mM norepinefrīna

3. Šķīdumu sterili filtrējiet caur 0,2 µm filtrējošo kasetni.

4. Ielejiet 1 ml alikvotas daļas no 100 reizes koncentrētā norepinefrīna pamatšķīduma sterilos flakonos un uzglabājiet −20 °C temperatūrā. Ietiniet alumīnija folijā; jāaizsargā no gaismas. Šķīdums ir stabils aptuveni 1 mēnesi −20 °C temperatūrā.

5. Pievienojiet 1 ml šā šķīduma 100 ml Claycomb barotnes. Barotne ir stabila tikai 1 mēnesi.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

Šūnu kultūras kolbas jāpārklāj ar fibronektīnu un želatīnu. 25 µg fibronektīna, izšķīdinātu 2 ml 0,02 % želatīna šķīduma ūdenī, ievieto T25 kolbā un inkubē nakti 37 °C temperatūrā.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu