Skip to content
HL-1
Tissue
Tim, tâm nhĩ trái
Disease
Tế bào cơ tim nhĩ bình thường (được bất tử hóa bằng kháng nguyên T lớn của SV40 thông qua dòng tế bào AT-1; co bóp tự phát; không gây ung thư khi sử dụng theo tiêu chuẩn)
Synonyms
HL1, HL-1 F2 P76

Documents

HL-1

Cell line · Product number 305264

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HL-1 là một dòng tế bào cơ tim được phân lập từ các tế bào cơ tim nhĩ của chuột trưởng thành. Dòng tế bào này có đặc điểm độc đáo là vẫn giữ được khả năng co bóp và duy trì kiểu hình cơ tim biệt hóa trong quá trình nuôi cấy lâu dài, khiến nó trở thành một mô hình vô cùng quý giá cho nghiên cứu tim mạch. Các tế bào HL-1 được sử dụng rộng rãi trong các nghiên cứu tập trung vào sinh lý học tim, điện sinh lý học và dược lý học. Khả năng co bóp tự phát và có thể kích thích của chúng cho phép các nhà nghiên cứu tìm hiểu các cơ chế phân tử cơ bản của chức năng cơ tim, bệnh lý và phản ứng với các tác nhân điều trị.

Tế bào HL-1 thể hiện các đặc điểm điển hình của tế bào cơ tim, bao gồm việc biểu hiện các dấu hiệu đặc hiệu của tim như troponin, myosin và connexin 43. Chúng phản ứng với các kích thích sinh lý và dược lý khác nhau, cho phép nghiên cứu chi tiết về các con đường truyền tín hiệu tim, chức năng kênh ion và tác động của thuốc lên tế bào tim. Dòng tế bào này đặc biệt có giá trị trong việc mô phỏng các rối loạn nhịp tim, phì đại và các bệnh lý tim mạch khác. Ngoài ra, tế bào HL-1 còn được sử dụng trong các thử nghiệm sàng lọc thuốc quy mô lớn nhằm xác định các hợp chất điều hòa chức năng tim, điều này rất quan trọng cho việc phát triển các phương pháp điều trị mới cho các bệnh tim mạch.

Tissue
Tim, tâm nhĩ trái
Disease
Tế bào cơ tim nhĩ bình thường (được bất tử hóa bằng kháng nguyên T lớn của SV40 thông qua dòng tế bào AT-1; co bóp tự phát; không gây ung thư khi sử dụng theo tiêu chuẩn)
Applications
Sinh lý học và điện sinh lý học tim; sinh học tế bào cơ tim; mô hình hóa rối loạn nhịp tim; chức năng kênh ion (IKr, INa, ICaL); phì đại và tái cấu trúc tim; tổn thương do thiếu máu cục bộ/tái tưới máu tim; sàng lọc độc tính tim của thuốc; sinh học connexin43 và khe nối; biểu hiện gen đặc hiệu tâm nhĩ (ANF, α-MHC, α-actin); thử nghiệm co bóp tự phát; sàng lọc thuốc tim mạch với năng suất cao; điện sinh lý học mảng đa điện cực (MEA)
Synonyms
  • HL1
  • HL-1 F2 P76

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự tế bào cơ tim
Cell type
Tế bào cơ tim
Doubling time
khoảng 24 đến 36 giờ

04Identifiers

Citation
HL-1 (Mã sản phẩm Cytion 305264)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0303

05Expression and susceptibility

Viruses
Biến thể: Virus khỉ 40 (SV40)

06Handling and culture

Culture medium

Môi trường Claycomb, 2 mM glutamine, 10% FBS, 0,1 mM norepinephrine trong axit L-ascorbic (Chúng tôi không bán sản phẩm này)

Chuẩn bị dung dịch norepinephrine 0,1 mM trong axit L-ascorbic:

Chuẩn bị dung dịch gốc nồng độ gấp 100 lần = 10 mM norepinephrine.

1. Chuẩn bị dung dịch axit L-ascorbic 30 mM (50 mL)

2. Thêm 160 mg norepinephrine vào dung dịch axit ascorbic (50 mL) = 10 mM norepinephrine

3. Lọc vô trùng dung dịch qua bộ lọc 0,2 µm.

4. Chia dung dịch gốc norepinephrine nồng độ 100 lần thành các phần 1 mL, cho vào các lọ vô trùng và bảo quản ở −20 °C. Bọc trong giấy bạc; phải tránh ánh sáng. Dung dịch này ổn định trong khoảng 1 tháng ở −20 °C.

5. Thêm 1 mL dung dịch này vào 100 mL môi trường Claycomb. Môi trường này chỉ ổn định trong 1 tháng.

Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% FBS, 2 mM glutamine, 0,1 mM norepinephrine trong axit L-ascorbic
Dissociation reagent
Accutase
Flask coating

Các bình nuôi cấy tế bào phải được phủ một lớp fibronectin và gelatin. 25 µg fibronectin, được hòa tan trong 2 ml dung dịch gelatin 0,02% trong nước, được cho vào bình T25 và ủ qua đêm ở 37°C

Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Split ratio
1 đến 3
Seeding density
2 đến 4 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
Hàng ngày (thay Claycomb Medium mỗi 24 giờ để duy trì kiểu hình co bóp)
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào vào các bình nuôi cấy đã được phủ fibronectin/gelatin (phủ trước bằng dung dịch chứa 12,5 µg/ml fibronectin và 0,02% gelatin; ủ ở 37°C trong ≥1 giờ, hút bỏ dung dịch trước khi cấy tế bào). Để tế bào bám dính và phục hồi trong 24–48 giờ trước khi thay môi trường lần đầu tiên. Sau đó, bổ sung môi trường Claycomb hàng ngày.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
C3HeB/FeJ chuyển gen
Donor age
Không xác định
Ethnicity
Không áp dụng (giống chuột chuyển gen C3HeB/FeJ; được nhân giống tại Q)

10Product details

Composition table