HL-1

HL-1 هو خط خلوي لعضلة القلب مستمد من خلايا عضلة القلب الأذينية لفأر بالغ. ويتميز هذا الخط الخلوي بكونه يحتفظ بقدرته على الانقباض والحفاظ على النمط الظاهري المتمايز لعضلة القلب خلال فترة الاستزراع الطويلة الأمد، مما يجعله نموذجًا لا غنى عنه لأبحاث القلب والأوعية الدموية. تُستخدم خلايا HL-1 على نطاق واسع في الدراسات التي تركز على فسيولوجيا القلب، والفيزيولوجيا الكهربية، وعلم الأدوية. وتتيح قدرتها على الخضوع لانقباضات تلقائية وقابلة للتحفيز للباحثين دراسة الآليات الجزيئية الكامنة وراء وظيفة عضلة القلب، وأمراضها، واستجابتها للعوامل العلاجية.

تُظهر خلايا HL-1 الخصائص النموذجية لخلايا عضلة القلب، بما في ذلك التعبير عن علامات خاصة بالقلب مثل التروبونين والميوسين والكونيكسين 43. وهي تستجيب لمختلف المحفزات الفسيولوجية والدوائية، مما يتيح إجراء دراسات تفصيلية لمسارات نقل الإشارات القلبية، ووظيفة القنوات الأيونية، وتأثيرات الأدوية على خلايا القلب. ويُعد هذا السلالة الخلوية ذات قيمة خاصة في نمذجة اضطرابات نظم القلب، وتضخم القلب، وغيرها من الأمراض القلبية. بالإضافة إلى ذلك، تُستخدم خلايا HL-1 في اختبارات فحص الأدوية عالية الإنتاجية التي تهدف إلى تحديد المركبات التي تنظم وظيفة القلب، وهو أمر بالغ الأهمية لتطوير علاجات جديدة لأمراض القلب والأوعية الدموية.

وسط كلايكومب، 2 مليمول/لتر من الجلوتامين، 10% من مصل الدم البقري (FBS)، 0.1 مليمول/لتر من النورإيبينفرين في حمض L-أسكوربيك (لا نبيعه)

تحضير 0.1 مليمول/مول من النورإيبينفرين في حمض L-أسكوربيك:

قم بإعداد محلول أساسي بتركيز 100 ضعف = 10 مليمول/لتر من النورإيبينفرين.

1. قم بإعداد محلول حمض L-أسكوربيك بتركيز 30 مليمولار (50 مل)

2. أضف 160 ملغ من النورإيبينفرين إلى محلول حمض الأسكوربيك (50 مل) = 10 مليمولار من النورإيبينفرين

3. قم بترشيح المحلول بطريقة معقمة عبر خرطوشة ترشيح 0.2 ميكرومتر.

4. قم بتعبئة أجزاء متساوية سعة 1 مل من المحلول الأساسي للنورإيبينفرين المركّز 100 ضعف في قوارير معقمة وقم بتخزينها عند درجة حرارة −20 درجة مئوية. لفها بورق الألمنيوم؛ يجب حمايتها من الضوء. يظل المحلول مستقرًا لمدة شهر تقريبًا عند درجة حرارة −20 درجة مئوية.

5. أضف 1 مل من هذا المحلول إلى 100 مل من وسط كلايكومب. يظل الوسط مستقرًا لمدة شهر واحد فقط.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

يجب طلاء قوارير زراعة الخلايا بالفيبرونكتين والجيلاتين. تُوضع كمية قدرها 25 ميكروغرام من الفيبرونكتين، مذابة في 2 مل من محلول جيلاتين بنسبة 0.02% في الماء، في قارورة T25 وتُترك في الحاضنة طوال الليل عند درجة حرارة 37 درجة مئوية

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان