HL-1

HL-1 è una linea cellulare di muscolo cardiaco derivata dai cardiomiociti atriali di un topo adulto. Questa linea cellulare è unica in quanto conserva la capacità di contrarsi e di mantenere un fenotipo cardiaco differenziato in coltura a lungo termine, il che la rende un modello prezioso per la ricerca cardiovascolare. Le cellule HL-1 sono ampiamente utilizzate negli studi di fisiologia, elettrofisiologia e farmacologia cardiaca. La loro capacità di subire contrazioni spontanee e inducibili consente ai ricercatori di studiare i meccanismi molecolari alla base della funzione del muscolo cardiaco, delle malattie e della risposta agli agenti terapeutici.

Le cellule HL-1 presentano caratteristiche tipiche delle cellule muscolari cardiache, tra cui l'espressione di marcatori specifici per il muscolo cardiaco, come la troponina, la miosina e la connexina 43. Sono reattive a vari tipi di fisiologia e a diversi tipi di agenti terapeutici. Sono reattive a vari stimoli fisiologici e farmacologici, consentendo studi dettagliati delle vie di trasduzione del segnale cardiaco, della funzione dei canali ionici e degli effetti dei farmaci sulle cellule cardiache. Questa linea cellulare è particolarmente preziosa per la modellazione di aritmie cardiache, ipertrofia e altre patologie cardiache. Inoltre, le cellule HL-1 sono utilizzate in saggi di screening farmacologico ad alto rendimento per identificare composti che modulano la funzione cardiaca, il che è fondamentale per lo sviluppo di nuovi trattamenti per le malattie cardiovascolari.

Terreno di coltura Claycomb, 2 mM di glutammina, 10% di FBS, 0,1 mM di noradrenalina in acido L-ascorbico (non in vendita)

Preparare 0,1 mM di noradrenalina in acido L-ascorbico:

Preparare una soluzione madre 100 volte più concentrata = 10 mM di noradrenalina.

1. Preparare una soluzione di acido L-ascorbico a 30 mM (50 mL)

2. Aggiungere 160 mg di noradrenalina alla soluzione di acido ascorbico (50 mL) = 10 mM di noradrenalina

3. Filtrare la soluzione in condizioni asettiche attraverso una cartuccia filtrante da 0,2 µm.

4. Versare aliquote da 1 mL della soluzione madre di noradrenalina 100 volte concentrata in fiale sterili e conservare a −20 °C. Avvolgere in un foglio di alluminio; deve essere protetta dalla luce. La soluzione è stabile per circa 1 mese a −20 °C.

5. Aggiungere 1 mL di questa soluzione a 100 mL di terreno di coltura Claycomb. Il terreno è stabile solo per 1 mese.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

Le fiasche per coltura cellulare devono essere rivestite con fibronectina e gelatina. Si versano 25 µg di fibronectina, disciolti in 2 ml di gelatina allo 0,02% in acqua, in una fiasca T25 e si incuba per una notte a 37 °C.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia