HL-1

HL-1 je bunková línia srdcového svalu odvodená z predsieňových kardiomyocytov dospelej myši. Táto bunková línia je jedinečná tým, že si aj pri dlhodobej kultivácii zachováva schopnosť kontrakcie a udržiava diferencovaný kardiálny fenotyp, čo z nej robí neoceniteľný model pre kardiovaskulárny výskum. Bunky HL-1 sa široko využívajú v štúdiách zameraných na fyziológiu srdca, elektrofyziológiu a farmakológiu. Ich schopnosť podliehať spontánnym a indukovateľným kontrakciám umožňuje výskumníkom skúmať molekulárne mechanizmy, ktoré sú základom funkcie srdcového svalu, ochorení a reakcie na terapeutické látky.

Bunky HL-1 vykazujú charakteristiky typické pre bunky srdcového svalu, vrátane expresie markerov špecifických pre srdce, ako sú troponín, myozín a konnexín 43. Reagujú na rôzne fyziologické a farmakologické podnety, čo umožňuje podrobné štúdium dráh prenosu signálov v srdci, funkcie iónových kanálov a účinkov liekov na srdcové bunky. Táto bunková línia je obzvlášť cenná pri modelovaní srdcových arytmií, hypertrofie a iných srdcových patológií. Okrem toho sa bunky HL-1 používajú vo vysokokapacitných skríningových testoch liekov zameraných na identifikáciu zlúčenín, ktoré modulujú srdcovú funkciu, čo je kľúčové pre vývoj nových spôsobov liečby kardiovaskulárnych ochorení.

Claycombovo médium, 2 mM glutamínu, 10 % FBS, 0,1 mM norepinefrínu v kyseline L-askorbovej (toto médium nepredávame)

Pripravte 0,1 mM norepinefrínu v kyseline L-askorbovej:

Pripravte 100-násobný zásobný roztok = 10 mM norepinefrínu.

1. Pripravte 30 mM roztok kyseliny L-askorbovej (50 mL)

2. Pridajte 160 mg norepinefrínu do roztoku kyseliny askorbovej (50 ml) = 10 mM norepinefrínu

3. Roztok sterilne prefiltrovajte cez 0,2-µm filtračnú vložku.

4. Naplňte 1-ml alikvóty 100-násobného zásobného roztoku norepinefrínu do sterilných injekčných liekoviek a uchovávajte pri teplote −20 °C. Zabalte do hliníkovej fólie; musí byť chránený pred svetlom. Roztok je stabilný približne 1 mesiac pri teplote −20 °C.

5. Pridajte 1 ml tohto roztoku do 100 ml Claycombovho média. Médium je stabilné iba 1 mesiac.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

Fľaše na bunkové kultúry musia byť potiahnuté fibronektínom a želatínou. 25 µg fibronektínu, rozpusteného v 2 ml 0,02 % roztoku želatíny vo vode, sa vloží do fľaše T25 a inkubuje sa cez noc pri teplote 37 °C.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke