HL-1

HL-1 הוא קו תאים של שריר הלב שמקורו בתאי שריר הלב הפרוזדורי של עכבר בוגר. קו תאים זה ייחודי בכך שהוא שומר על היכולת להתכווץ ולשמור על פנוטיפ לבבי מובחן גם במהלך תרבית ארוכת טווח, מה שהופך אותו למודל בעל ערך רב למחקר בתחום הלב וכלי הדם. תאי HL-1 נמצאים בשימוש נרחב במחקרים המתמקדים בפיזיולוגיה של הלב, באלקטרופיזיולוגיה ובפרמקולוגיה. יכולתם לעבור התכווצויות ספונטניות וניתנות לגירוי מאפשרת לחוקרים לחקור את המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס תפקוד שריר הלב, מחלות ותגובתו לחומרים טיפוליים.

תאי HL-1 מפגינים מאפיינים האופייניים לתאי שריר הלב, לרבות ביטוי של סמנים ספציפיים ללב כגון טרופונין, מיוזין וקונקסין 43. הם מגיבים לגירויים פיזיולוגיים ופרמקולוגיים שונים, מה שמאפשר מחקרים מפורטים על מסלולי העברת האותות בלב, תפקוד תעלות היונים והשפעות התרופות על תאי הלב. קו תאים זה בעל ערך רב במיוחד למודלים של הפרעות קצב לבביות, היפרטרופיה ופתולוגיות לבביות אחרות. בנוסף, תאי HL-1 משמשים בבדיקות סינון תרופות בקצב גבוה, שמטרתן זיהוי תרכובות המשפיעות על תפקוד הלב, דבר שהוא חיוני לפיתוח טיפולים חדשים למחלות לב וכלי דם.

תמיסת קלייקומב, 2 מ"מ גלוטמין, 10% FBS, 0.1 מ"מ נוראפינפרין בחומצה L-אסקורבית (איננו מוכרים)

הכן 0.1 mM נוראפינפרין בחומצה L-אסקורבית:

הכינו תמיסת בסיס בריכוז גבוה פי 100 = 10 mM נוראפינפרין.

1. הכינו תמיסת חומצה L-אסקורבית בריכוז של 30 mM (50 מ"ל)

2. הוסיפו 160 מ"ג נוראפינפרין לתמיסת חומצה אסקורבית (50 מ"ל) = 10 מ"מ נוראפינפרין

3. סננו את התמיסה באופן סטרילי באמצעות מחסנית סינון של 0.2 מיקרומטר.

4. מלאו מנות של 1 מ"ל מתמיסת הבסיס של נוראפינפרין המרוכזת פי 100 לתוך בקבוקונים סטריליים ואחסנו בטמפרטורה של −20 °C. עטפו בנייר אלומיניום; יש להגן על התמיסה מפני אור. התמיסה יציבה למשך כחודש בטמפרטורה של −20 °C.

5. יש להוסיף 1 מ"ל מתמיסה זו ל-100 מ"ל של מצע קלייקומב. המצע יציב למשך חודש אחד בלבד.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

יש לצפות את בקבוקי תרבית התאים בפיברונקטין ובג'לטין. יש להכניס 25 מיקרוגרם פיברונקטין, המומס ב-2 מ"ל של תמיסת ג'לטין בריכוז 0.02% במים, לבקבוק T25 ולהשאירו באינקובטור למשך לילה בטמפרטורה של 37°C

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו