HL-1

HL-1 es una línea celular de músculo cardíaco derivada de los cardiomiocitos auriculares de un ratón adulto. Esta línea celular es única en el sentido de que conserva la capacidad de contraerse y mantener un fenotipo cardíaco diferenciado durante el cultivo a largo plazo, lo que la convierte en un modelo inestimable para la investigación cardiovascular. Las células HL-1 se utilizan ampliamente en estudios centrados en la fisiología, la electrofisiología y la farmacología cardiacas. Su capacidad para experimentar contracciones espontáneas e inducibles permite a los investigadores estudiar los mecanismos moleculares que subyacen a la función del músculo cardíaco, las enfermedades y la respuesta a agentes terapéuticos.

Las células HL-1 presentan las características típicas de las células musculares cardíacas, incluida la expresión de marcadores específicos cardíacos como la troponina, la miosina y la conexina 43. Responden a diversos procesos fisiológicos y farmacológicos. Responden a diversos estímulos fisiológicos y farmacológicos, lo que permite realizar estudios detallados de las vías de transducción de señales cardíacas, la función de los canales iónicos y los efectos de los fármacos en las células cardíacas. Esta línea celular es especialmente valiosa para modelizar arritmias cardíacas, hipertrofia y otras patologías cardíacas. Además, las células HL-1 se utilizan en ensayos de cribado de fármacos de alto rendimiento destinados a identificar compuestos que modulen la función cardiaca, lo que resulta crucial para el desarrollo de nuevos tratamientos de enfermedades cardiovasculares.

Medio Claycomb, 2 mM de glutamina, 10 % de FBS, 0,1 mM de norepinefrina en ácido L-ascórbico (no lo comercializamos)

Preparar 0,1 mM de norepinefrina en ácido L-ascórbico:

Prepare una solución madre 100 veces más concentrada = 10 mM de norepinefrina.

1. Prepara una solución de ácido L-ascórbico a 30 mM (50 ml)

2. Añada 160 mg de norepinefrina a la solución de ácido ascórbico (50 ml) = 10 mM de norepinefrina

3. Filtra la solución de forma estéril mediante un cartucho filtrante de 0,2 µm.

4. Introducir alícuotas de 1 ml de la solución madre de norepinefrina 100 veces concentrada en viales estériles y conservarlas a −20 °C. Envolverlos en papel de aluminio; deben protegerse de la luz. La solución es estable durante aproximadamente 1 mes a −20 °C.

5. Añadir 1 ml de esta solución a 100 ml de medio Claycomb. El medio solo es estable durante 1 mes.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

Los frascos de cultivo celular deben recubrirse con fibronectina y gelatina. Se introducen 25 µg de fibronectina, disueltos en 2 ml de gelatina al 0,02 % en agua, en un frasco T25 y se incuban durante toda la noche a 37 °C.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía