HL-1

Η HL-1 είναι μια κυτταρική σειρά καρδιακού μυός που προέρχεται από τα κολπικά καρδιομυοκύτταρα ενός ενήλικου ποντικιού. Αυτή η κυτταρική σειρά είναι μοναδική, καθώς διατηρεί την ικανότητα να συστέλλεται και να διατηρεί έναν διαφοροποιημένο καρδιακό φαινότυπο κατά τη διάρκεια μακροχρόνιας καλλιέργειας, γεγονός που την καθιστά ένα ανεκτίμητο μοντέλο για την καρδιαγγειακή έρευνα. Τα κύτταρα HL-1 χρησιμοποιούνται ευρέως σε μελέτες που εστιάζουν στην καρδιακή φυσιολογία, την ηλεκτροφυσιολογία και τη φαρμακολογία. Η ικανότητά τους να υφίστανται αυθόρμητες και επαγόμενες συστολές επιτρέπει στους ερευνητές να διερευνήσουν τους μοριακούς μηχανισμούς που διέπουν τη λειτουργία του καρδιακού μυός, τις παθήσεις και την απόκριση σε θεραπευτικά μέσα.

Τα κύτταρα HL-1 παρουσιάζουν χαρακτηριστικά τυπικά των καρδιακών μυϊκών κυττάρων, συμπεριλαμβανομένης της έκφρασης καρδιακών ειδικών δεικτών όπως η τροπονίνη, η μυοσίνη και η κοννεξίνη 43. Ανταποκρίνονται σε διάφορα φυσιολογικά και φαρμακολογικά ερεθίσματα, επιτρέποντας λεπτομερείς μελέτες των οδών μεταγωγής καρδιακών σημάτων, της λειτουργίας των ιοντικών διαύλων και των επιδράσεων των φαρμάκων στα καρδιακά κύτταρα. Αυτή η κυτταρική σειρά είναι ιδιαίτερα πολύτιμη για τη μοντελοποίηση καρδιακών αρρυθμιών, υπερτροφίας και άλλων καρδιακών παθολογιών. Επιπλέον, τα κύτταρα HL-1 χρησιμοποιούνται σε δοκιμασίες διαλογής φαρμάκων υψηλής απόδοσης με στόχο τον εντοπισμό ενώσεων που ρυθμίζουν την καρδιακή λειτουργία, κάτι που είναι ζωτικής σημασίας για την ανάπτυξη νέων θεραπειών για καρδιαγγειακές παθήσεις.

Μέσο Claycomb, 2 mM γλουταμίνη, 10% FBS, 0,1 mM νορεπινεφρίνη σε L-ασκορβικό οξύ (Δεν διατίθεται προς πώληση)

Παρασκευάστε 0,1 mM νορεπινεφρίνη σε L-ασκορβικό οξύ:

Παρασκευάστε ένα 100-πλάσιο διάλυμα βάσης = 10 mM νορεπινεφρίνη.

1. Παρασκευάστε διάλυμα L-ασκορβικού οξέος 30 mM (50 mL)

2. Προσθέστε 160 mg νορεπινεφρίνης στο διάλυμα ασκορβικού οξέος (50 mL) = 10 mM νορεπινεφρίνης

3. Φιλτράρετε αποστειρωμένα το διάλυμα μέσω φίλτρου 0,2 µm.

4. Γεμίστε αλικότες των 1 mL του 100-πλάσιου διαλύματος-βάσης νορεπινεφρίνης σε αποστειρωμένα φιαλίδια και αποθηκεύστε τα στους −20 °C. Τυλίξτε τα με αλουμινόχαρτο· πρέπει να προστατεύονται από το φως. Το διάλυμα είναι σταθερό για περίπου 1 μήνα στους −20 °C.

5. Προσθέστε 1 mL αυτού του διαλύματος σε 100 mL μέσου Claycomb. Το μέσο είναι σταθερό μόνο για 1 μήνα.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Τα φιαλίδια κυτταροκαλλιέργειας πρέπει να επικαλυφθούν με ινονεκτίνη και ζελατίνη. 25 µg ινονεκτίνης, διαλυμένα σε 2 ml διαλύματος ζελατίνης 0,02% σε νερό, τοποθετούνται σε φιαλίδιο T25 και επωάζονται όλη τη νύχτα στους 37 °C

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης