HL-1

HL-1, yetişkin bir farenin atriyal kardiyomiyositlerinden elde edilen bir kalp kası hücre hattıdır. Bu hücre hattı, uzun süreli kültür koşullarında kasılma yeteneğini ve farklılaşmış kardiyak fenotipini koruma özelliğiyle benzersizdir; bu da onu kardiyovasküler araştırmalar için paha biçilmez bir model haline getirir. HL-1 hücreleri, kalp fizyolojisi, elektrofizyoloji ve farmakolojiye odaklanan çalışmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Spontan ve indüklenebilir kasılmalar gösterme yetenekleri, araştırmacıların kalp kası fonksiyonu, hastalıkları ve terapötik ajanlara verilen yanıtın altında yatan moleküler mekanizmaları incelemelerine olanak tanır.

HL-1 hücreleri, troponin, miyozin ve konneksin 43 gibi kalbe özgü belirteçlerin ekspresyonu da dahil olmak üzere, kalp kası hücrelerine özgü özellikler sergiler. Çeşitli fizyolojik ve farmakolojik uyaranlara duyarlı olmaları, kalp sinyal iletim yolakları, iyon kanalı fonksiyonu ve ilaçların kalp hücreleri üzerindeki etkilerinin ayrıntılı olarak incelenmesini mümkün kılar. Bu hücre hattı, kalp aritmileri, hipertrofi ve diğer kalp patolojilerinin modellenmesi açısından özellikle değerlidir. Ayrıca, HL-1 hücreleri, kardiyovasküler hastalıklar için yeni tedavilerin geliştirilmesinde hayati öneme sahip olan kalp fonksiyonunu düzenleyen bileşiklerin tanımlanmasına yönelik yüksek verimli ilaç tarama testlerinde kullanılır.

Claycomb besiyeri, 2 mM glutamin, %10 FBS, L-askorbik asit içinde 0,1 mM norepinefrin (Satışa sunulmamaktadır)

L-askorbik asit içinde 0,1 mM norepinefrin hazırlayın:

100 katlık stok çözelti hazırlayın = 10 mM norepinefrin.

1. 30 mM L-askorbik asit çözeltisi (50 mL) hazırlayın

2. Askorbik asit çözeltisine (50 mL) 160 mg norepinefrin ekleyin = 10 mM norepinefrin

3. Çözeltiyi 0,2 µm'lik bir filtre kartuşundan steril olarak süzün.

4. 100 katlı norepinefrin ana çözeltisinden 1 mL'lik alıkotları steril şişelere doldurun ve −20 °C'de saklayın. Alüminyum folyoya sarın; ışıktan korunmalıdır. Çözelti, −20 °C'de yaklaşık 1 ay boyunca stabildir.

5. 1 mL bu çözeltiyi 100 mL Claycomb besiyerine ekleyin. Besiyeri sadece 1 ay boyunca stabildir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Hücre kültürü şişeleri fibronektin ve jelatin ile kaplanmalıdır. 2 ml su içinde %0,02 jelatin çözeltisi içinde çözülmüş 25 µg fibronektin, bir T25 şişesine konur ve 37°C’de bir gece boyunca inkübe edilir.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın