HL-1

HL-1 on südamelihasrakkude liin, mis on saadud täiskasvanud hiire vatsakambri kardiomüotsüütidest. See rakuliin on ainulaadne selle poolest, et säilitab pikaajalise kultiveerimise käigus võime kokku tõmbuda ja säilitada diferentseeritud südamefenotüübi, mis teeb sellest hindamatu mudeli kardiovaskulaarsete uuringute jaoks. HL-1 rakke kasutatakse laialdaselt uuringutes, mis keskenduvad südame füsioloogiale, elektrofüsioloogiale ja farmakoloogiale. Nende võime läbida spontaanseid ja indutseeritavaid kokkutõmbeid võimaldab teadlastel uurida molekulaarseid mehhanisme, mis on aluseks südamelihase funktsioonile, haigustele ja ravimite toimele.

HL-1-rakud ilmutavad südamelihasrakkudele iseloomulikke omadusi, sealhulgas südamespetsiifiliste markerite, nagu troponiini, müosiini ja konneksiini 43, ekspressiooni. Need reageerivad mitmesugustele füsioloogilistele ja farmakoloogilistele stiimulitele, võimaldades põhjalikult uurida südame signaaliülekande radu, ioonikanalite funktsiooni ja ravimite mõju südamerakkudele. See rakuliin on eriti väärtuslik südamerütmihäirete, hüpertroofia ja muude südamehaiguste modelleerimiseks. Lisaks kasutatakse HL-1 rakke suure läbilaskevõimega ravimite sõelumiskatsetes, mille eesmärk on tuvastada ühendeid, mis mõjutavad südame funktsiooni, mis on otsustava tähtsusega uute südame-veresoonkonna haiguste ravimeetodite väljatöötamisel.

Claycombi kasvukeskkond, 2 mM glutamiini, 10% FBS, 0,1 mM norepinefriini L-askorbiinhappes (me ei müü seda)

Valmistage 0,1 mM norepinefriini lahus L-askorbiinhappes:

Valmistage 100-kordne kontsentraatlahus = 10 mM norepinefriin.

1. Valmistage 30 mM L-askorbiinhappe lahus (50 ml)

2. Lisage 160 mg norepinefriini askorbiinhappe lahusele (50 ml) = 10 mM norepinefriini

3. Filtreerige lahus steriilselt läbi 0,2 µm filtrikasseti.

4. Täitke 1 ml alikvoote 100-kordsest norepinefriini kontsentraadist steriilsetesse viaalidesse ja hoidke neid −20 °C juures. Mähkige alumiiniumfooliumisse; tuleb kaitsta valguse eest. Lahus on stabiilne umbes 1 kuu jooksul −20 °C juures.

5. Lisage 1 ml seda lahust 100 ml Claycombi kasvukeskkonnale. Kasvukeskkond on stabiilne vaid 1 kuu.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

Rakukultuuri pudelid tuleb katta fibronektiini ja želatiiniga. 25 µg fibronektiini, mis on lahustatud 2 ml vees lahustatud 0,02% želatiini lahuses, valatakse T25-pudelisse ja inkubeeritakse üleöö 37 °C juures.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest