HL-1

HL-1 е клетъчна линия на сърдечния мускул, получена от предсърдни кардиомиоцити на възрастна мишка. Тази клетъчна линия е уникална с това, че запазва способността си да се свива и да поддържа диференциран сърдечен фенотип при дългосрочно култивиране, което я превръща в безценен модел за изследвания в областта на сърдечно-съдовата система. Клетките HL-1 се използват широко в изследвания, фокусирани върху сърдечната физиология, електрофизиология и фармакология. Способността им да претърпяват спонтанни и индуцирани контракции позволява на изследователите да проучват молекулярните механизми, лежащи в основата на функцията на сърдечния мускул, заболяванията и реакцията към терапевтични средства.

Клетките HL-1 проявяват характеристики, типични за клетките на сърдечния мускул, включително експресията на специфични за сърцето маркери като тропонин, миозин и конексин 43. Те реагират на различни физиологични и фармакологични стимули, което позволява подробни изследвания на пътищата за пренос на сигнали в сърцето, функцията на йонните канали и ефектите на лекарствата върху сърдечните клетки. Тази клетъчна линия е особено ценна за моделиране на сърдечни аритмии, хипертрофия и други сърдечни патологии. Освен това HL-1 клетките се използват в тестове за скрининг на лекарства с висока производителност, насочени към идентифициране на съединения, които модулират сърдечната функция, което е от решаващо значение за разработването на нови методи за лечение на сърдечно-съдови заболявания.

Среда на Клейкомб, 2 mM глутамин, 10% FBS, 0,1 mM норепинефрин в L-аскорбинова киселина (Не се предлага за продажба)

Пригответе 0,1 mM норепинефрин в L-аскорбинова киселина:

Пригответе 100-кратен запасен разтвор = 10 mM норепинефрин.

1. Пригответе разтвор от 30 mM L-аскорбинова киселина (50 mL)

2. Добавете 160 mg норепинефрин към разтвора на аскорбинова киселина (50 mL) = 10 mM норепинефрин

3. Стерилно филтрирайте разтвора през 0,2-µm филтърна касета.

4. Напълнете стерилни флакони с аликвоти от 1 mL от 100-кратния основен разтвор на норепинефрин и съхранявайте при −20 °C. Увийте във фолио; трябва да се предпазва от светлина. Разтворът е стабилен за приблизително 1 месец при −20 °C.

5. Добавете 1 мл от този разтвор към 100 мл среда на Клейкомб. Средата е стабилна само за 1 месец.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

Флаконите за клетъчни култури трябва да бъдат покрити с фибронектин и желатин. 25 µg фибронектин, разтворен в 2 ml 0,02% разтвор на желатин във вода, се поставят в T25 и се инкубират през нощта при 37 °C

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация