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HSF(SV40)
Site métastatique
Sans objet (fibroblaste splénique normal ; immortalisé par le SV40)

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HSF(SV40)

Cell line · Référence du produit 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00hors taxes et frais de port
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Recommandé (lot le plus récent)
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1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire immortalisée HSF(SV40) se réfère à des cellules qui ont été génétiquement modifiées pour exprimer le grand antigène T (T-Ag) du virus simien 40 (SV40), qui facilite l'immortalisation cellulaire. L'antigène T du SV40 est une puissante oncoprotéine qui interagit avec des protéines suppressives de tumeurs essentielles, telles que p53 et la protéine du rétinoblastome (Rb), ce qui entraîne l'inactivation de leurs fonctions suppressives de tumeurs. Cette interaction perturbe les mécanismes normaux de contrôle du cycle cellulaire, ce qui permet aux cellules de contourner la sénescence et de proliférer indéfiniment.

En raison de leur nature immortalisée et de l'implication critique du SV40 T-Ag dans leur transformation, les cellules HSF(SV40) sont largement utilisées dans la recherche sur le cancer, en particulier dans les études liées à l'oncogenèse virale, à la régulation du cycle cellulaire et aux interventions thérapeutiques ciblant les chaperons moléculaires et les voies de suppression des tumeurs. Leur utilisation fournit des informations précieuses sur l'interaction entre les oncoprotéines virales et les réseaux de régulation des cellules hôtes, ouvrant ainsi la voie au développement de thérapies ciblées contre le cancer.

Site métastatique
Sans objet (fibroblaste splénique normal ; immortalisé par le SV40)
Applications
Oncogenèse du SV40 ; biologie des gènes suppresseurs de tumeurs p53/Rb ; régulation du cycle cellulaire ; biologie des fibroblastes ; biologie du cancer

02Classification

Organisme
Humain
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type fibroblastique
Type de cellule
Fibroblaste
Temps de doublement
environ 24 à 36 heures

04Identifiants

Référence
HSF(SV40) (numéro de catalogue Cytion 305338)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Laver avec du PBS, ajouter de l'Accutase (8 à 10 min à température ambiante), remettre en suspension, centrifuger à 300 × g pendant 3 min, puis réensemencer.
Rapport de fractionnement
1 à 3
Densité de semis
1 à 3 × 10⁴ cellules/cm²
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.