HSF(SV40)
Cell line · Preces numurs 305338
The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...
Pielāgošana / Ieteikumi
- HSF(SV40)Cell line€1,500.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
HSF(SV40) imortalizēta šūnu līnija attiecas uz šūnām, kas ir ģenētiski modificētas, lai ekspresētu Simian Virus 40 (SV40) lielo T-antigēnu (T-Ag), kas veicina šūnu imortalizāciju. SV40 T-Ag ir spēcīgs onkoproteīns, kas mijiedarbojas ar svarīgākajiem audzēju supresoru proteīniem, piemēram, p53 un retinoblastomas proteīnu (Rb), izraisot to audzējus nomācošo funkciju inaktivāciju. Šī mijiedarbība izjauc normālos šūnu cikla kontroles mehānismus, ļaujot šūnām apiet novecošanu un vairoties bezgalīgi.
Tā kā HSF(SV40) šūnas ir nemortalizētas un to transformācijā būtiski iesaistīts SV40 T-Ag, tās plaši izmanto vēža pētījumos, jo īpaši pētījumos, kas saistīti ar vīrusu onkoģenēzi, šūnu cikla regulāciju un terapeitiskām intervencēm, kas vērstas uz molekulārajiem šaperoniem un audzēju nomācošajiem ceļiem. To izmantošana sniedz vērtīgu ieskatu vīrusu onkoproteīnu un saimnieka šūnu regulējošo tīklu mijiedarbībā, paverot ceļu mērķtiecīgu vēža terapiju izstrādei.
- Metastāžu vieta
- Neattiecas (parasts liesas fibroblasts; SV40 imortalizēts)
- Pieteikumi
- SV40 onkogēnēze; p53/Rb audzēju supresoru bioloģija; šūnu cikla regulācija; fibroblastu bioloģija; vēža bioloģija
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- ĢMO statuss
- GMO-S1
- Sīkāka informācija par ĢMO statusu
- GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Fibroblastiem līdzīgs
- Šūnu tips
- Fibroblasti
- Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
- aptuveni 24 līdz 36 stundas
04Identifikatori
- Atsauce
- HSF(SV40) (Cytion kataloga numurs 305338)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- Not assigned
05Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Nomazgājiet ar PBS, pievienojiet Accutase (8–10 min istabas temperatūrā), atkārtoti suspendējiet, centrifugējiet 300×g 3 min, atkārtoti izsējiet.
- Sadalījuma attiecība
- no 1 līdz 3
- Sēšanas blīvums
- 1 līdz 3 × 10⁴ šūnas/cm²
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
07Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā
