Pāriet uz saturu
HSF(SV40)
Metastāžu vieta
Neattiecas (parasts liesas fibroblasts; SV40 imortalizēts)

Dokumenti

HSF(SV40)

Cell line · Preces numurs 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HSF(SV40) imortalizēta šūnu līnija attiecas uz šūnām, kas ir ģenētiski modificētas, lai ekspresētu Simian Virus 40 (SV40) lielo T-antigēnu (T-Ag), kas veicina šūnu imortalizāciju. SV40 T-Ag ir spēcīgs onkoproteīns, kas mijiedarbojas ar svarīgākajiem audzēju supresoru proteīniem, piemēram, p53 un retinoblastomas proteīnu (Rb), izraisot to audzējus nomācošo funkciju inaktivāciju. Šī mijiedarbība izjauc normālos šūnu cikla kontroles mehānismus, ļaujot šūnām apiet novecošanu un vairoties bezgalīgi.

Tā kā HSF(SV40) šūnas ir nemortalizētas un to transformācijā būtiski iesaistīts SV40 T-Ag, tās plaši izmanto vēža pētījumos, jo īpaši pētījumos, kas saistīti ar vīrusu onkoģenēzi, šūnu cikla regulāciju un terapeitiskām intervencēm, kas vērstas uz molekulārajiem šaperoniem un audzēju nomācošajiem ceļiem. To izmantošana sniedz vērtīgu ieskatu vīrusu onkoproteīnu un saimnieka šūnu regulējošo tīklu mijiedarbībā, paverot ceļu mērķtiecīgu vēža terapiju izstrādei.

Metastāžu vieta
Neattiecas (parasts liesas fibroblasts; SV40 imortalizēts)
Pieteikumi
SV40 onkogēnēze; p53/Rb audzēju supresoru bioloģija; šūnu cikla regulācija; fibroblastu bioloģija; vēža bioloģija

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Šūnu tips
Fibroblasti
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
aptuveni 24 līdz 36 stundas

04Identifikatori

Atsauce
HSF(SV40) (Cytion kataloga numurs 305338)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Nomazgājiet ar PBS, pievienojiet Accutase (8–10 min istabas temperatūrā), atkārtoti suspendējiet, centrifugējiet 300×g 3 min, atkārtoti izsējiet.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 3
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 × 10⁴ šūnas/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.