Mine otse sisu juurde
HSF(SV40)
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (tavaline põrna fibroblast; SV40-ga surematuks muudetud)

Dokumendid

HSF(SV40)

Cell line · Toote number 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HSF(SV40) immortaliseeritud rakuliin viitab rakkudele, mis on geneetiliselt muundatud, et ekspresseerida Simian Virus 40 (SV40) suurt T-antigeeni (T-Ag), mis hõlbustab rakkude immortaliseerimist. SV40 T-Ag on tugev onkoproteiin, mis interakteerub kriitiliste kasvajasupressorvalkudega, nagu p53 ja retinoblastoomi valk (Rb), mis viib nende kasvajat pärssivate funktsioonide inaktiveerimiseni. See koostoime häirib normaalseid rakutsükli kontrollimehhanisme, võimaldades rakkudel vananemisest mööda minna ja piiramatult paljuneda.

Tänu nende immortaliseeritud olemusele ja SV40 T-Ag kriitilisele osalusele nende transformatsioonis kasutatakse HSF(SV40)-rakke laialdaselt vähiuuringutes, eriti uuringutes, mis on seotud viirusliku onkogeneesi, rakutsükli reguleerimise ja molekulaarseid šaperoone ja kasvajasupressoriteedele suunatud terapeutiliste sekkumistega. Nende kasutamine annab väärtusliku ülevaate viirusliku onkoproteiini ja peremeesraku regulatiivsete võrgustike vahelisest vastasmõjust, mis sillutab teed vähktõve sihtotstarbeliste ravimeetodite väljatöötamisele.

Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (tavaline põrna fibroblast; SV40-ga surematuks muudetud)
Rakendused
SV40-viiruse poolt põhjustatud vähktõve teke; p53/Rb kasvajavastaste geenide bioloogia; rakutsükli reguleerimine; fibroblastide bioloogia; vähibioloogia

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Rakutüüp
Fibroblastide
Kahekordistumisaeg
umbes 24–36 tundi

04Tunnused

Viide
HSF(SV40) (Cytioni katalooginumber 305338)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Pese PBS-ga, lisa Accutase (8–10 min toatemperatuuril), suspendeeri uuesti, tsentrifuugi 300×g 3 minutit, külvata uuesti.
Jagamissuhe
1–3
Külvitihedus
1–3 × 10⁴ rakku/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.