Skip to content
HSF(SV40)
Metastatic site
Không áp dụng (tế bào sợi lách bình thường; được bất tử hóa bằng SV40)

Documents

HSF(SV40)

Cell line · Product number 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào bất tử HSF(SV40) đề cập đến các tế bào đã được biến đổi gen để biểu hiện kháng nguyên T lớn của virus khỉ 40 (SV40), giúp tế bào trở nên bất tử. SV40 T-Ag là một protein gây ung thư mạnh mẽ, tương tác với các protein ức chế ung thư quan trọng như p53 và protein retinoblastoma (Rb), dẫn đến việc vô hiệu hóa chức năng ức chế ung thư của chúng. Sự tương tác này làm rối loạn các cơ chế kiểm soát chu kỳ tế bào bình thường, cho phép tế bào vượt qua quá trình lão hóa và nhân lên vô hạn.

Do bản chất bất tử của chúng và sự tham gia quan trọng của SV40 T-Ag trong quá trình biến đổi, các tế bào HSF(SV40) được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu ung thư, đặc biệt trong các nghiên cứu liên quan đến ung thư do virus, điều hòa chu kỳ tế bào và các can thiệp điều trị nhắm vào các protein chaperone phân tử và các con đường ức chế ung thư. Việc sử dụng chúng cung cấp những hiểu biết quý giá về sự tương tác giữa các protein ung thư virus và các mạng lưới điều hòa của tế bào chủ, mở đường cho việc phát triển các liệu pháp ung thư nhắm mục tiêu.

Metastatic site
Không áp dụng (tế bào sợi lách bình thường; được bất tử hóa bằng SV40)
Applications
Quá trình hình thành ung thư do SV40; Sinh học của các gen ức chế khối u p53/Rb; Điều hòa chu kỳ tế bào; Sinh học tế bào sợi; Sinh học ung thư

02Classification

Organism
Human
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào giống fibroblast
Cell type
Tế bào sợi
Doubling time
khoảng 24 đến 36 giờ

04Identifiers

Citation
HSF(SV40) (Số catalog Cytion 305338)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Rửa bằng PBS, thêm Accutase (8–10 phút ở nhiệt độ phòng), khuấy đều để tế bào lơ lửng, ly tâm ở 300×g trong 3 phút, rồi gieo lại.
Split ratio
1 đến 3
Seeding density
1 đến 3 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.