Skip to content
HSF(SV40)
Metastatic site
ไม่เกี่ยวข้อง (เซลล์ไฟโบรบลาสต์ของม้ามปกติ; ชนิด SV40-ทำให้เป็นอมตะ)

Documents

HSF(SV40)

Cell line · Product number 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ HSF(SV40) ที่ถูกทำให้เป็นอมตะ หมายถึง เซลล์ที่ได้รับการดัดแปลงพันธุกรรมให้แสดงออกโปรตีน T-antigen (T-Ag) ขนาดใหญ่ของไวรัสลิงซิมิアン 40 (SV40) ซึ่งช่วยในการทำให้เซลล์เป็นอมตะSV40 T-Ag เป็นออนโคโปรตีนที่มีฤทธิ์แรงซึ่งมีปฏิสัมพันธ์กับโปรตีนยับยั้งเนื้องอกที่สำคัญ เช่น p53 และโปรตีนเรตินบลาสโตมา (Rb) ส่งผลให้การทำงานในการยับยั้งเนื้องอกของโปรตีนเหล่านี้ถูกปิดกั้น ปฏิสัมพันธ์นี้ทำให้กลไกควบคุมวงจรชีวิตของเซลล์ปกติถูกรบกวน ทำให้เซลล์สามารถหลีกเลี่ยงกระบวนการชราภาพและเพิ่มจำนวนได้อย่างไม่จำกัด

เนื่องจากลักษณะที่ไม่สามารถตายได้และการมีส่วนร่วมที่สำคัญของ SV40 T-Ag ในการเปลี่ยนแปลงของพวกมัน เซลล์ HSF(SV40) จึงถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยมะเร็ง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาที่เกี่ยวข้องกับไวรัสก่อมะเร็ง การควบคุมวัฏจักรของเซลล์ และการแทรกแซงการรักษาที่มุ่งเป้าไปที่ตัวช่วยขนส่งโมเลกุลและเส้นทางยับยั้งเนื้องอก การใช้เซลล์เหล่านี้ให้ข้อมูลเชิงลึกที่มีค่าเกี่ยวกับปฏิสัมพันธ์ระหว่างโปรตีนก่อมะเร็งของไวรัสและเครือข่ายการควบคุมของเซลล์เจ้าบ้าน ซึ่งเป็นการปูทางไปสู่การพัฒนาวิธีการรักษามะเร็งที่มุ่งเป้าเฉพาะเจาะจง

Metastatic site
ไม่เกี่ยวข้อง (เซลล์ไฟโบรบลาสต์ของม้ามปกติ; ชนิด SV40-ทำให้เป็นอมตะ)
Applications
การเกิดมะเร็ง SV40; ชีววิทยาของยีนกดการเกิดมะเร็ง p53/Rb; การควบคุมวัฏจักรเซลล์; ชีววิทยาของไฟโบรบลาสต์; ชีววิทยามะเร็ง

02Classification

Organism
Human
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายไฟโบรบลาสต์
Cell type
ไฟโบรบลาสต์
Doubling time
ประมาณ 24 ถึง 36 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
HSF(SV40) (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305338)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
ล้างด้วย PBS, เติม Accutase (8–10 นาที ที่อุณหภูมิห้อง), ละลายใหม่, ปั่นเหวี่ยง 300×g 3 นาที, ปลูกถ่ายใหม่.
Split ratio
1 ถึง 3
Seeding density
1 ถึง 3 × 10⁴ เซลล์/ตารางเซนติเมตร
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า