Премини към съдържанието
HSF(SV40)
Място на метастазите
Неприложимо (нормален фибробласт от далака; иммортализиран с SV40)

Документи

HSF(SV40)

Cell line · Номер на продукта 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Имортализираната клетъчна линия HSF(SV40) се отнася до клетки, които са генетично модифицирани, за да експресират големия Т-антиген (T-Ag) на Simian Virus 40 (SV40), който улеснява клетъчната имортализация. SV40 T-Ag е мощен онкопротеин, който взаимодейства с критични туморсупресорни протеини, като p53 и ретинобластомен протеин (Rb), което води до дезактивиране на техните туморсупресивни функции. Това взаимодействие нарушава нормалните механизми за контрол на клетъчния цикъл, като позволява на клетките да заобиколят стареенето и да се размножават безкрайно.

Поради безсмъртния им характер и решаващото участие на SV40 T-Ag в тяхната трансформация HSF(SV40) клетките се използват широко в изследванията на рака, особено в проучвания, свързани с вирусната онкогенеза, регулацията на клетъчния цикъл и терапевтичните интервенции, насочени към молекулярните шаперони и тумор супресорните пътища. Използването им осигурява ценни познания за взаимодействието между вирусните онкопротеини и регулаторните мрежи на клетките-гостоприемници, като проправя пътя за разработването на целеви терапии за рак.

Място на метастазите
Неприложимо (нормален фибробласт от далака; иммортализиран с SV40)
Приложения
Онкогенеза на SV40; биология на туморните супресори p53/Rb; регулация на клетъчния цикъл; биология на фибробластите; биология на рака

02Класификация

Организъм
Човек
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на фибробласти
Тип клетка
Фибробласти
Време за удвояване
приблизително 24 до 36 часа

04Идентификатори

Източник
HSF(SV40) (каталожен номер 305338 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
Not assigned

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Измийте с PBS, добавете Accutase (8–10 мин. при стайна температура), ресуспендирайте, центрофугирайте при 300×g в продължение на 3 мин., след което повторно засейте.
Коефициент на разделяне
от 1 до 3
Плътност на засяването
от 1 до 3 × 10⁴ клетки/см²
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.