Siirry sisältöön
HSF(SV40)
Metastaasikohde
Ei sovelleta (normaali pernan fibroblasti; SV40:llä ikuistettu)

Asiakirjat

HSF(SV40)

Cell line · Tuotenumero 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HSF(SV40)-immortalisoitu solulinja tarkoittaa soluja, jotka on geneettisesti muunnettu ilmentämään Simian Virus 40 (SV40) -viruksen suurta T-antigeenia (T-Ag), joka helpottaa solujen kuolemattomuutta. SV40 T-Ag on voimakas onkoproteiini, joka on vuorovaikutuksessa kriittisten kasvainsuppressoriproteiinien, kuten p53:n ja retinoblastoomaproteiinin (Rb), kanssa, mikä johtaa niiden kasvainsuppressiivisten toimintojen inaktivoitumiseen. Tämä vuorovaikutus häiritsee normaaleja solusyklin valvontamekanismeja, jolloin solut voivat ohittaa senesenssin ja lisääntyä loputtomiin.

Koska HSF(SV40)-solut ovat kuolemattomia ja SV40 T-Ag:n osuus niiden muuntumisessa on ratkaisevan tärkeä, niitä käytetään laajalti syöpätutkimuksessa, erityisesti tutkimuksissa, jotka liittyvät viruksen aiheuttamaan onkogeneesiin, solusyklin säätelyyn ja molekyylikapinallisiin chaperoneihin ja kasvainsuppressorireitteihin kohdistuviin terapeuttisiin interventioihin. Niiden käyttö tarjoaa arvokasta tietoa viruksen onkoproteiinien ja isäntäsolujen säätelyverkostojen välisestä vuorovaikutuksesta, mikä tasoittaa tietä kohdennettujen syöpähoitojen kehittämiselle.

Metastaasikohde
Ei sovelleta (normaali pernan fibroblasti; SV40:llä ikuistettu)
Sovellukset
SV40:n syövän synty; p53/Rb-kasvainsuppressorigeenien biologia; solusyklin säätely; fibroblastien biologia; syöpäbiologia

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastien kaltaiset
Solutyyppi
Fibroblastit
Kaksinkertaistumisaika
noin 24–36 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
HSF(SV40) (Cytionin luettelonumero 305338)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Pese PBS:llä, lisää Accutase (8–10 min huoneenlämmössä), sekoita uudelleen, sentrifugoi 300×g:ssa 3 minuuttia, siirrä solut uuteen astiaan.
Jakosuhde
1–3
Kylvötiheys
1–3 × 10⁴ solua/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.