
- Metastaasikohde
- Ei sovelleta (normaali pernan fibroblasti; SV40:llä ikuistettu)
Asiakirjat
HSF(SV40)
Cell line · Tuotenumero 305338
The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...
Räätälöinti / Suositukset
- HSF(SV40)Cell line€1,500.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
HSF(SV40)-immortalisoitu solulinja tarkoittaa soluja, jotka on geneettisesti muunnettu ilmentämään Simian Virus 40 (SV40) -viruksen suurta T-antigeenia (T-Ag), joka helpottaa solujen kuolemattomuutta. SV40 T-Ag on voimakas onkoproteiini, joka on vuorovaikutuksessa kriittisten kasvainsuppressoriproteiinien, kuten p53:n ja retinoblastoomaproteiinin (Rb), kanssa, mikä johtaa niiden kasvainsuppressiivisten toimintojen inaktivoitumiseen. Tämä vuorovaikutus häiritsee normaaleja solusyklin valvontamekanismeja, jolloin solut voivat ohittaa senesenssin ja lisääntyä loputtomiin.
Koska HSF(SV40)-solut ovat kuolemattomia ja SV40 T-Ag:n osuus niiden muuntumisessa on ratkaisevan tärkeä, niitä käytetään laajalti syöpätutkimuksessa, erityisesti tutkimuksissa, jotka liittyvät viruksen aiheuttamaan onkogeneesiin, solusyklin säätelyyn ja molekyylikapinallisiin chaperoneihin ja kasvainsuppressorireitteihin kohdistuviin terapeuttisiin interventioihin. Niiden käyttö tarjoaa arvokasta tietoa viruksen onkoproteiinien ja isäntäsolujen säätelyverkostojen välisestä vuorovaikutuksesta, mikä tasoittaa tietä kohdennettujen syöpähoitojen kehittämiselle.
- Metastaasikohde
- Ei sovelleta (normaali pernan fibroblasti; SV40:llä ikuistettu)
- Sovellukset
- SV40:n syövän synty; p53/Rb-kasvainsuppressorigeenien biologia; solusyklin säätely; fibroblastien biologia; syöpäbiologia
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- GMO-status
- GMO-S1
- GMO-statuksen tiedot
- GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Fibroblastien kaltaiset
- Solutyyppi
- Fibroblastit
- Kaksinkertaistumisaika
- noin 24–36 tuntia
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- HSF(SV40) (Cytionin luettelonumero 305338)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- Not assigned
05Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Pese PBS:llä, lisää Accutase (8–10 min huoneenlämmössä), sekoita uudelleen, sentrifugoi 300×g:ssa 3 minuuttia, siirrä solut uuteen astiaan.
- Jakosuhde
- 1–3
- Kylvötiheys
- 1–3 × 10⁴ solua/cm²
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
07Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä