الانتقال إلى المحتوى
HSF(SV40)
موقع الانتشار
لا ينطبق (خلايا ليفية طحالية طبيعية؛ مُخلَّدة بفيروس SV40)

المستندات

HSF(SV40)

Cell line · رقم المنتج 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

يشير خط الخلايا الخالدة HSF (SV40) إلى الخلايا التي تم تعديلها وراثياً للتعبير عن مستضد T-antigen (T-Ag) الكبير لفيروس سيميان 40 (SV40)، الذي يسهل عملية الخلود الخلوي. إن SV40 T-Ag هو بروتين سرطاني قوي يتفاعل مع البروتينات المثبطة للورم مثل بروتين p53 وبروتين ريتينوبلاستوما (Rb)، مما يؤدي إلى تعطيل وظائفها المثبطة للورم. يؤدي هذا التفاعل إلى تعطيل آليات التحكم في دورة الخلية الطبيعية، مما يسمح للخلايا بتجاوز الشيخوخة والتكاثر إلى أجل غير مسمى.

ونظراً لطبيعتها غير الخالدة والتدخل الحاسم لخلايا SV40 T-Ag في تحولها، تُستخدم خلايا HSF(SV40) على نطاق واسع في أبحاث السرطان، خاصة في الدراسات المتعلقة بتكوين الأورام الفيروسية وتنظيم دورة الخلية والتدخلات العلاجية التي تستهدف المرافقات الجزيئية ومسارات كابتة الأورام. ويوفر استخدامها رؤى قيمة في التفاعل بين البروتينات السرطانية الفيروسية والشبكات التنظيمية للخلايا المضيفة، مما يمهد الطريق لتطوير علاجات السرطان المستهدفة.

موقع الانتشار
لا ينطبق (خلايا ليفية طحالية طبيعية؛ مُخلَّدة بفيروس SV40)
التطبيقات
تكوين الأورام بفيروس SV40؛ بيولوجيا مثبطات الأورام p53/Rb؛ تنظيم دورة الخلية؛ بيولوجيا الخلايا الليفية؛ بيولوجيا السرطان

02التصنيف

كائن حي
إنسان
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
أرومة ليفية شبيهة بالأرومة الليفية
نوع الخلية
الأرومة الليفية
زمن المضاعفة
حوالي 24 إلى 36 ساعة

04المعرّفات

المرجع
HSF(SV40) (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305338)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
Not assigned

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
اغسل بالـPBS، وأضف Accutase (8–10 دقائق في درجة حرارة الغرفة)، وأعد تعليق الخلايا، ثم قم بالطرد المركزي بسرعة 300×g لمدة 3 دقائق، ثم أعد زرع الخلايا.
نسبة التقسيم
من 1 إلى 3
كثافة البذر
من 1 إلى 3 × 10⁴ خلية/سم²
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.