
- Metastasenherd
- Nicht zutreffend (normaler Milzfibroblast; durch SV40 immortalisiert)
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HSF(SV40)
Cell line · Artikelnummer 305338
The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...
Anpassung / Empfehlungen
- HSF(SV40)Cell line€1,500.00
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01Allgemeine Informationen
- Beschreibung
Bei der immortalisierten HSF(SV40)-Zelllinie handelt es sich um Zellen, die gentechnisch so verändert wurden, dass sie das große T-Antigen (T-Ag) des Simian Virus 40 (SV40) exprimieren, das die zelluläre Immortalisierung erleichtert. SV40 T-Ag ist ein starkes Onkoprotein, das mit wichtigen Tumorsuppressorproteinen wie p53 und dem Retinoblastom-Protein (Rb) interagiert, was zur Inaktivierung ihrer tumorsuppressiven Funktionen führt. Diese Interaktion unterbricht die normalen Kontrollmechanismen des Zellzyklus und ermöglicht es den Zellen, die Seneszenz zu umgehen und sich unbegrenzt zu vermehren.
Aufgrund ihres unsterblichen Charakters und der entscheidenden Beteiligung von SV40 T-Ag an ihrer Transformation werden HSF(SV40)-Zellen in der Krebsforschung häufig verwendet, insbesondere bei Studien zur viralen Onkogenese, zur Zellzyklusregulation und zu therapeutischen Maßnahmen, die auf molekulare Chaperone und Tumorsuppressorwege abzielen. Ihre Verwendung liefert wertvolle Einblicke in das Zusammenspiel zwischen viralen Onkoproteinen und regulatorischen Netzwerken der Wirtszelle und ebnet den Weg für die Entwicklung gezielter Krebstherapien.
- Metastasenherd
- Nicht zutreffend (normaler Milzfibroblast; durch SV40 immortalisiert)
- Anwendungen
- SV40-Onkogenese; Biologie der Tumorsuppressoren p53 und Rb; Zellzyklusregulation; Fibroblastenbiologie; Krebsbiologie
02Klassifizierung
- Organismus
- Mensch
- Wachstumseigenschaften
- Anhänger
- GVO-Status
- GMO-S1
- Angaben zum GVO-Status
- GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biologische Sicherheitsstufe
- 1
03Merkmale
- Morphologie
- Fibroblastenähnlich
- Zelltyp
- Fibroblasten
- Verdopplungszeit
- ca. 24 bis 36 Stunden
04Bezeichner
- Quellenangabe
- HSF(SV40) (Cytion Katalognummer 305338)
- NCBI-Steuer-ID
- 9606
- Cellosaurus
- Not assigned
05Handhabung und Kultur
- Nährmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
- Inkubationsatmosphäre
37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.
- Nahrungsergänzungsmittel
- Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
- Dissoziationsreagenz
- Accutase
- Subkultivierung
- Mit PBS waschen, Accutase hinzufügen (8–10 Min. bei Raumtemperatur), resuspendieren, bei 300×g 3 Min. zentrifugieren, erneut ausplattieren.
- Split-Verhältnis
- 1 bis 3
- Aussaatdichte
- 1 bis 3 × 10⁴ Zellen/cm²
- Flüssigkeitswechsel
- 2 bis 3 Mal pro Woche
- Auftauen und Kultivierung
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung
- Sterilität
Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.
Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.
- Gefriermedium
- Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
- Lagerbedingungen
Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.
- Versandbedingungen
Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.
07Rechtliches und Sicherheit
- Sicherheitshinweise
- Wenn Sie planen, ein Kryovial in flüssigem Stickstoff zu lagern, um es später aufzutauen, müssen Sie strenge Sicherheitsmaßnahmen einhalten. Geeignete Schutzhandschuhe und -kleidung sind unerlässlich, und beim Transfer der gefrorenen Proben in den oder aus dem Flüssigstickstofftank ist das Tragen einer Gesichtsmaske oder einer Schutzbrille erforderlich. Damit soll die Verletzungsgefahr durch mögliche Explosionen der Kryovials bei der Entnahme, die zum Herausschleudern von scharfen Fragmenten führen können, verringert werden.
- Garantie
Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen
Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung
- Materialübertragungsvereinbarung erforderlich
- Ja