Prejsť na obsah
HSF(SV40)
Miesto metastáz
Neplatí (normálny fibroblast sleziny; imortalizovaný vírusom SV40)

Dokumenty

HSF(SV40)

Cell line · Číslo výrobku 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

HSF(SV40) imortalizovaná bunková línia sa vzťahuje na bunky, ktoré boli geneticky modifikované tak, aby exprimovali veľký T-antigén (T-Ag) vírusu Simian 40 (SV40), ktorý uľahčuje bunkovú imortalizáciu. SV40 T-Ag je silný onkoproteín, ktorý interaguje s kritickými tumor supresorovými proteínmi, ako sú p53 a retinoblastómový proteín (Rb), čo vedie k deaktivácii ich tumor supresorových funkcií. Táto interakcia narúša normálne mechanizmy kontroly bunkového cyklu, čo umožňuje bunkám obísť senescenciu a množiť sa donekonečna.

Vzhľadom na ich imortalizovanú povahu a rozhodujúcu účasť T-Ag SV40 na ich transformácii sa bunky HSF(SV40) široko využívajú vo výskume rakoviny, najmä v štúdiách týkajúcich sa vírusovej onkogenézy, regulácie bunkového cyklu a terapeutických zásahov zameraných na molekulárne šaperóny a dráhy potláčajúce nádory. Ich použitie poskytuje cenné poznatky o vzájomnom pôsobení medzi vírusovými onkoproteínmi a regulačnými sieťami hostiteľských buniek, čím sa otvára cesta k vývoju cielených terapií rakoviny.

Miesto metastáz
Neplatí (normálny fibroblast sleziny; imortalizovaný vírusom SV40)
Aplikácie
Onkogenéza vírusu SV40; biológia tumorových supresorov p53/Rb; regulácia bunkového cyklu; biológia fibroblastov; biológia rakoviny

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblastom podobné
Typ bunky
Fibroblasty
Doba zdvojnásobenia
približne 24 až 36 hodín

04Identifikátory

Citácia
HSF(SV40) (katalógové číslo Cytion 305338)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Prepláchnite PBS, pridajte Accutase (8–10 minút pri izbovej teplote), znovu suspendujte, odstreďte pri 300×g po dobu 3 minút a znovu naneste na kultivačný povrch.
Pomer rozdelenia
1 až 3
Hustota výsevu
1 až 3 × 10⁴ buniek/cm²
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.