Gå direkte til indholdet
HSF(SV40)
Metastasested
Ikke relevant (normal miltfibroblast; SV40-immortaliseret)

Dokumenter

HSF(SV40)

Cell line · Varenummer 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Den immortaliserede HSF(SV40)-cellelinje refererer til celler, der er blevet genetisk modificeret til at udtrykke det store T-antigen (T-Ag) fra Simian Virus 40 (SV40), som muliggør cellulær immortalisering. SV40 T-Ag er et potent onkoprotein, der interagerer med kritiske tumorundertrykkende proteiner, såsom p53 og retinoblastomaprotein (Rb), hvilket fører til inaktivering af deres tumorundertrykkende funktioner. Denne interaktion forstyrrer normale kontrolmekanismer for cellecyklus, så cellerne kan omgå senescens og sprede sig på ubestemt tid.

På grund af deres udødelige natur og den kritiske involvering af SV40 T-Ag i deres transformation anvendes HSF(SV40)-celler i vid udstrækning i kræftforskning, især i undersøgelser relateret til viral onkogenese, cellecyklusregulering og terapeutiske indgreb rettet mod molekylære chaperoner og tumorundertrykkende veje. Brugen af dem giver værdifuld indsigt i samspillet mellem virale onkoproteiner og værtscellens reguleringsnetværk, hvilket baner vejen for udvikling af målrettede kræftbehandlinger.

Metastasested
Ikke relevant (normal miltfibroblast; SV40-immortaliseret)
Anvendelser
SV40-onkogenese; p53/Rb-tumorsuppressorbiologi; regulering af cellecyklussen; fibroblastbiologi; kræftbiologi

02Klassificering

Organisme
Menneske
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Fibroblast-lignende
Celletype
Fibroblast
Fordoblingstid
ca. 24 til 36 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HSF(SV40) (Cytion katalognummer 305338)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Vask med PBS, tilsæt Accutase (8–10 min ved stuetemperatur), resuspender, centrifuger ved 300×g i 3 min, og udså igen.
Opdelingsforhold
1 til 3
Såtæthed
1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.