Preskoči na vsebino
HSF(SV40)
Mesto metastaze
Ne velja (normalni fibroblast v vranici; imortaliziran s SV40)

Dokumenti

HSF(SV40)

Cell line · Številka izdelka 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Imortalizirana celična linija HSF(SV40) se nanaša na celice, ki so bile gensko spremenjene za izražanje velikega T-antigena (T-Ag) virusa Simian 40 (SV40), ki omogoča celično nesmrtnost. SV40 T-Ag je močan onkoprotein, ki interagira s ključnimi tumorskimi supresorskimi proteini, kot sta p53 in retinoblastomski protein (Rb), kar vodi do inaktivacije njihovih tumorskih supresorskih funkcij. Ta interakcija moti normalne mehanizme nadzora celičnega cikla, kar celicam omogoča, da obidejo senescenco in se neomejeno razmnožujejo.

Zaradi njihove nesmrtnosti in odločilne vpletenosti T-Ag SV40 v njihovo transformacijo se celice HSF(SV40) pogosto uporabljajo v raziskavah raka, zlasti v študijah, povezanih z virusno onkogenezo, regulacijo celičnega cikla in terapevtskimi posegi, usmerjenimi v molekularne šaperone in poti tumorskih supresorjev. Njihova uporaba omogoča dragocen vpogled v medsebojno delovanje virusnih onkoproteinov in regulativnih omrežij gostiteljskih celic, kar utira pot razvoju ciljnih terapij raka.

Mesto metastaze
Ne velja (normalni fibroblast v vranici; imortaliziran s SV40)
Uporaba
Onkogeneza SV40; biologija tumorskih supresorjev p53/Rb; regulacija celičnega cikla; biologija fibroblastov; biologija raka

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblastom podobni
Vrsta celice
Fibroblast
Čas podvojitve
približno 24 do 36 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
HSF(SV40) (kataloška številka Cytion 305338)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Operite s PBS, dodajte Accutase (8–10 min pri sobni temperaturi), ponovno suspendirajte, centrifugirajte pri 300×g 3 min, ponovno posadite.
Razmerje delitve
1 do 3
Gostota setve
1 do 3 × 10⁴ celic/cm²
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.