Gå til innholdet
HSF(SV40)
Metastaseområde
Ikke relevant (normal miltfibroblast; SV40-immortaliseret)

Dokumenter

HSF(SV40)

Cell line · Produktnummer 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HSF(SV40)-indødeliggjort cellelinje er celler som er blitt genetisk modifisert til å uttrykke det store T-antigenet (T-Ag) fra Simian Virus 40 (SV40), som muliggjør udødeliggjøring av celler. SV40 T-Ag er et potent onkoprotein som interagerer med viktige tumorsuppressorproteiner, som p53 og retinoblastomprotein (Rb), noe som fører til inaktivering av deres tumorundertrykkende funksjoner. Denne interaksjonen forstyrrer normale mekanismer for kontroll av cellesyklusen, slik at cellene kan omgå senescens og spre seg i det uendelige.

På grunn av deres udødeliggjorte natur og den kritiske innblandingen av SV40 T-Ag i deres transformasjon, er HSF(SV40)-celler mye brukt i kreftforskning, særlig i studier knyttet til viral onkogenese, cellesyklusregulering og terapeutiske intervensjoner rettet mot molekylære chaperoner og tumorsuppressorveier. Bruken av HSF(SV40)-celler gir verdifull innsikt i samspillet mellom virale onkoproteiner og vertscellens reguleringsnettverk, noe som baner vei for utvikling av målrettede kreftbehandlinger.

Metastaseområde
Ikke relevant (normal miltfibroblast; SV40-immortaliseret)
Søknader
SV40-onkogenese; biologi knyttet til tumorsuppressorene p53 og Rb; regulering av cellesyklusen; fibroblastbiologi; kreftbiologi

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblastlignende
Celletype
Fibroblast
Fordoblingstid
ca. 24 til 36 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HSF(SV40) (Cytion katalognummer 305338)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Vask med PBS, tilsett Accutase (8–10 min ved romtemperatur), resuspender, sentrifuger ved 300×g i 3 min, og så på nytt.
Oppdelingsforhold
1 til 3
Såtetthet
1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.