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HSF(SV40)
転移部位
該当なし(正常な脾臓線維芽細胞;SV40により不死化)

HSF(SV40)

Cell line · 製品番号 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

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01概要

説明

HSF(SV40)不死化細胞株とは、シミアンウイルス40(SV40)ラージT抗原(T-Ag)を発現するように遺伝子改変された細胞のことで、細胞の不死化を促進する。SV40 T-Agは強力なオンコプロテインであり、p53やレチノブラストーマタンパク質(Rb)などの重要な癌抑制タンパク質と相互作用し、それらの癌抑制機能を不活性化する。この相互作用は正常な細胞周期制御機構を破壊し、細胞が老化を回避して無期限に増殖することを可能にする。

HSF(SV40)細胞は、その不死化された性質と、その形質転換におけるSV40 T-Agの重要な関与のために、がん研究、特にウイルスの発がん、細胞周期の制御、分子シャペロンやがん抑制経路を標的とした治療介入に関連する研究に広く用いられている。HSF(SV40)細胞の使用は、ウイルスの腫瘍タンパク質と宿主細胞の制御ネットワークとの相互作用に関する貴重な洞察を提供し、標的がん治療法の開発への道を開くものである。

転移部位
該当なし(正常な脾臓線維芽細胞;SV40により不死化)
用途
SV40による発がん;p53/Rb腫瘍抑制遺伝子の生物学;細胞周期の制御;線維芽細胞の生物学;がん生物学

02分類

生物
人間
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
線維芽細胞様
細胞の種類
線維芽細胞
倍増時間
約24~36時間

04識別子

引用
HSF(SV40) (Cytion カタログ番号 305338)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
Not assigned

05取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
PBSで洗浄し、Accutaseを添加して(室温で8~10分間)、再懸濁し、300×gで3分間遠心分離した後、再び培養皿に播種する。
分割比率
1~3
播種密度
1~3 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。