Langsung ke isi
HSF(SV40)
Lokasi metastasis
Tidak berlaku (fibroblas limpa normal; diimortalkan dengan SV40)

Dokumen

HSF(SV40)

Cell line · Nomor produk 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel yang diawetkan HSF (SV40) mengacu pada sel yang telah dimodifikasi secara genetik untuk mengekspresikan antigen T-antigen (T-Ag) besar Simian Virus 40 (SV40), yang memfasilitasi pengawetan sel. SV40 T-Ag adalah onkoprotein kuat yang berinteraksi dengan protein penekan tumor yang penting, seperti p53 dan protein retinoblastoma (Rb), yang mengarah pada inaktivasi fungsi penekan tumor. Interaksi ini mengganggu mekanisme kontrol siklus sel normal, memungkinkan sel untuk melewati penuaan dan berkembang biak tanpa batas.

Karena sifatnya yang diabadikan dan keterlibatan penting SV40 T-Ag dalam transformasinya, sel HSF (SV40) banyak digunakan dalam penelitian kanker, terutama dalam penelitian yang berkaitan dengan onkogenesis virus, regulasi siklus sel, dan intervensi terapeutik yang menargetkan pendamping molekuler dan jalur penekan tumor. Penggunaannya memberikan wawasan yang berharga tentang interaksi antara onkoprotein virus dan jaringan pengatur sel inang, membuka jalan bagi pengembangan terapi kanker yang ditargetkan.

Lokasi metastasis
Tidak berlaku (fibroblas limpa normal; diimortalkan dengan SV40)
Aplikasi
Onkogenesis SV40; biologi penekan tumor p53/Rb; regulasi siklus sel; biologi fibroblas; biologi kanker

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
GMO-S1
Rincian status GMO
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti fibroblast
Jenis sel
Fibroblast
Waktu penggandaan
sekitar 24 hingga 36 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
HSF (SV40) (Nomor katalog Cytion 305338)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM, w: 4,5 g/L Glukosa, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natrium piruvat (Nomor artikel Cytion 820300a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Cuci dengan PBS, tambahkan Accutase (8–10 menit pada suhu kamar), larutkan kembali, sentrifugasi pada 300×g selama 3 menit, lalu tanam kembali.
Rasio pemisahan
1 sampai 3
Kepadatan penanaman
1 hingga 3 × 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.