Přejít na obsah
HSF(SV40)
Místo metastázy
Neplatí (normální fibroblast sleziny; imortalizovaný virem SV40)

Dokumenty

HSF(SV40)

Cell line · Číslo výrobku 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Imortalizovaná buněčná linie HSF(SV40) označuje buňky, které byly geneticky modifikovány tak, aby exprimovaly velký T-antigen (T-Ag) viru Simian 40 (SV40), který usnadňuje buněčnou imortalizaci. SV40 T-Ag je silný onkoprotein, který interaguje s kritickými nádorovými supresorovými proteiny, jako je p53 a retinoblastomový protein (Rb), což vede k inaktivaci jejich nádorově supresivních funkcí. Tato interakce narušuje normální mechanismy kontroly buněčného cyklu, což umožňuje buňkám obcházet senescenci a neomezeně se množit.

Vzhledem k jejich imortalizované povaze a rozhodujícímu podílu T-Ag SV40 na jejich transformaci jsou HSF(SV40) buňky široce využívány ve výzkumu rakoviny, zejména ve studiích týkajících se virové onkogeneze, regulace buněčného cyklu a terapeutických zásahů zaměřených na molekulární chaperony a nádorové supresorové dráhy. Jejich použití poskytuje cenné poznatky o vzájemném působení virových onkoproteinů a regulačních sítí hostitelských buněk, což otevírá cestu k vývoji cílených terapií rakoviny.

Místo metastázy
Neplatí (normální fibroblast sleziny; imortalizovaný virem SV40)
Aplikace
Onkogeneze SV40; biologie tumor-supresorových genů p53 a Rb; regulace buněčného cyklu; biologie fibroblastů; biologie rakoviny

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblastům podobné
Typ buňky
Fibroblasty
Doba zdvojnásobení
přibližně 24 až 36 hodin

04Identifikátory

Citace
HSF(SV40) (katalogové číslo Cytion 305338)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Promýt PBS, přidat Accutase (8–10 min při pokojové teplotě), resuspendovat, odstředit při 300×g po dobu 3 min, znovu vysít.
Poměr rozdělení
1 až 3
Hustota výsevu
1 až 3 × 10⁴ buněk/cm²
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.