Μετάβαση στο περιεχόμενο
HSF(SV40)
Θέση μετάστασης
Δεν ισχύει (φυσιολογικός ινοβλάστης της σπλήνας· αθανατοποιημένος με SV40)

Έγγραφα

HSF(SV40)

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η αθάνατη κυτταρική σειρά HSF (SV40) αναφέρεται σε κύτταρα που έχουν τροποποιηθεί γενετικά ώστε να εκφράζουν το μεγάλο Τ-αντιγόνο (T-Ag) του ιού Simian Virus 40 (SV40), το οποίο διευκολύνει την κυτταρική αθανασία. Το SV40 T-Ag είναι μια ισχυρή ογκοπρωτεΐνη που αλληλεπιδρά με κρίσιμες ογκοκατασταλτικές πρωτεΐνες, όπως η p53 και η πρωτεΐνη ρετινοβλαστώματος (Rb), οδηγώντας στην απενεργοποίηση των ογκοκατασταλτικών τους λειτουργιών. Η αλληλεπίδραση αυτή διαταράσσει τους φυσιολογικούς μηχανισμούς ελέγχου του κυτταρικού κύκλου, επιτρέποντας στα κύτταρα να παρακάμπτουν τη γήρανση και να πολλαπλασιάζονται επ' αόριστον.

Λόγω της αθάνατης φύσης τους και της κρίσιμης συμμετοχής του SV40 T-Ag στον μετασχηματισμό τους, τα κύτταρα HSF(SV40) χρησιμοποιούνται ευρέως στην έρευνα για τον καρκίνο, ιδίως σε μελέτες που σχετίζονται με την ογκογένεση από ιούς, τη ρύθμιση του κυτταρικού κύκλου και τις θεραπευτικές παρεμβάσεις που στοχεύουν σε μοριακούς συνοδούς και ογκοκατασταλτικά μονοπάτια. Η χρήση τους παρέχει πολύτιμες πληροφορίες για την αλληλεπίδραση μεταξύ των ιικών ογκοπρωτεϊνών και των ρυθμιστικών δικτύων των κυττάρων του ξενιστή, ανοίγοντας το δρόμο για την ανάπτυξη στοχευμένων θεραπειών για τον καρκίνο.

Θέση μετάστασης
Δεν ισχύει (φυσιολογικός ινοβλάστης της σπλήνας· αθανατοποιημένος με SV40)
Εφαρμογές
Ογκογένεση του SV40· βιολογία των ογκοκατασταλτικών πρωτεϊνών p53/Rb· ρύθμιση του κυτταρικού κύκλου· βιολογία των ινοβλαστών· βιολογία του καρκίνου

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S1
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Ινοβλάστες που μοιάζουν με ινοβλάστες
Τύπος κυττάρου
Ινοβλάστες
Χρόνος διπλασιασμού
περίπου 24 έως 36 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
HSF(SV40) (αριθμός καταλόγου Cytion 305338)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
Not assigned

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Πλύνετε με PBS, προσθέστε Accutase (8–10 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου), ανακατέψτε, φυγοκεντρήστε στα 300×g για 3 λεπτά, και επανασπέρνετε.
Αναλογία διαχωρισμού
1 έως 3
Πυκνότητα σποράς
1 έως 3 × 10⁴ κύτταρα/cm²
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.