
- Metastatic site
- Sans objet (fibroblaste splénique normal; immortalisé par le SV40)
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HSF(SV40)
Cell line · Product number 305338
The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...
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01General information
- Description
La lignée cellulaire immortalisée HSF(SV40) désigne des cellules qui ont été génétiquement modifiées pour exprimer le grand antigène T (T-Ag) du virus simien 40 (SV40), ce qui facilite l’immortalisation cellulaire. L’antigène T du SV40 est une oncoprotéine puissante qui interagit avec des protéines suppressives de tumeurs essentielles, telles que la protéine p53 et la protéine du rétinoblastome (Rb), entraînant l’inactivation de leurs fonctions suppressives de tumeurs. Cette interaction perturbe les mécanismes normaux de contrôle du cycle cellulaire, permettant ainsi aux cellules de contourner la sénescence et de proliférer indéfiniment.
En raison de leur nature immortalisée et de l’implication cruciale de l’antigène T du SV40 dans leur transformation, les cellules HSF(SV40) sont largement utilisées dans la recherche sur le cancer, en particulier dans les études liées à l’oncogenèse virale, à la régulation du cycle cellulaire et aux interventions thérapeutiques ciblant les chaperons moléculaires et les voies de suppression tumorale. Leur utilisation fournit des informations précieuses sur l’interaction entre les oncoprotéines virales et les réseaux de régulation des cellules hôtes, ouvrant la voie au développement de thérapies anticancéreuses ciblées.
- Metastatic site
- Sans objet (fibroblaste splénique normal; immortalisé par le SV40)
- Applications
- Oncogenèse du SV40; biologie des gènes suppresseurs de tumeurs p53 et Rb; régulation du cycle cellulaire; biologie des fibroblastes; biologie du cancer
02Classification
- Organism
- Human
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De type fibroblaste
- Cell type
- Fibroblaste
- Doubling time
- environ 24 à 36 heures
04Identifiers
- Citation
- HSF(SV40) (numéro de catalogue Cytion 305338)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- Not assigned
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Laver avec du PBS, ajouter de l’Accutase (8 à 10 min à température ambiante), remettre en suspension, centrifuger à 300 × g pendant 3 min, puis réensemencer.
- Split ratio
- 1 à 3
- Seeding density
- de 1 à 3 × 10⁴ cellules/cm²
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
07Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes