Skip to content
HSF(SV40)
Metastatic site
לא רלוונטי (פיברובלסט רגיל של הטחול; שהפך לבלתי-מותי באמצעות SV40)

Documents

HSF(SV40)

Cell line · Product number 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

US$1,500.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים המונצחים HSF(SV40) מתייחס לתאים שעברו שינוי גנטי כדי לבטא את האנטיגן T הגדול (T-Ag) של נגיף Simian Virus 40 (SV40), המסייע בהנצחת התאים. SV40 T-Ag הוא אונקופרוטאין חזק המקיים אינטראקציה עם חלבוני מדכאי גידולים קריטיים, כגון p53 וחלבון רטינובלסטומה (Rb), מה שמוביל להשבית את תפקודיהם המדכאים גידולים. אינטראקציה זו משבשת את מנגנוני הבקרה הרגילים של מחזור התא, ומאפשרת לתאים לעקוף את הזקנה ולהתרבות ללא הגבלה.

בשל אופיין המונצח והמעורבות הקריטית של SV40 T-Ag בהפיכתן, תאי HSF(SV40) נמצאים בשימוש נרחב במחקר הסרטן, במיוחד במחקרים הקשורים לאונקוגנזה נגיפית, ויסות מחזור התא והתערבויות טיפוליות המכוונות לחלבוני ליווי מולקולריים ולמסלולי מדכאי גידולים. השימוש בהם מספק תובנות חשובות על האינטראקציה בין חלבוני אונקו נגיפיים ורשתות ויסות של תאי מארח, ומפלס את הדרך לפיתוח טיפולים ממוקדים בסרטן.

Metastatic site
לא רלוונטי (פיברובלסט רגיל של הטחול; שהפך לבלתי-מותי באמצעות SV40)
Applications
אונקוגנזה של SV40; ביולוגיה של מדכאי הגידול p53/Rb; ויסות מחזור התא; ביולוגיה של פיברובלסטים; ביולוגיה של הסרטן

02Classification

Organism
Human
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי פיברובלסט
Cell type
פיברובלסט
Doubling time
כ-24 עד 36 שעות

04Identifiers

Citation
HSF(SV40) (מספר קטלוגי Cytion 305338)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
יש לשטוף ב-PBS, להוסיף Accutase (8–10 דקות בטמפרטורת החדר), לערבב מחדש, לסובב בצנטריפוגה ב-300×g למשך 3 דקות, ולזרוע מחדש.
Split ratio
1 עד 3
Seeding density
1 עד 3 × 10⁴ תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.