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HSF(SV40)
Lugar de metástasis
No aplicable (fibroblasto esplénico normal; inmortalizado con SV40)

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HSF(SV40)

Cell line · Número de producto 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

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01Información general

Descripción

La línea celular inmortalizada HSF(SV40) se refiere a células que han sido modificadas genéticamente para expresar el antígeno T grande (T-Ag) del virus Simian 40 (SV40), que facilita la inmortalización celular. El SV40 T-Ag es una potente oncoproteína que interactúa con proteínas supresoras de tumores críticas, como la p53 y la proteína del retinoblastoma (Rb), lo que provoca la inactivación de sus funciones supresoras de tumores. Esta interacción altera los mecanismos normales de control del ciclo celular, lo que permite a las células eludir la senescencia y proliferar indefinidamente.

Debido a su naturaleza inmortalizada y a la implicación crítica del SV40 T-Ag en su transformación, las células HSF(SV40) se utilizan ampliamente en la investigación del cáncer, especialmente en estudios relacionados con la oncogénesis viral, la regulación del ciclo celular y las intervenciones terapéuticas dirigidas a chaperonas moleculares y vías supresoras de tumores. Su uso proporciona información valiosa sobre la interacción entre las oncoproteínas virales y las redes reguladoras de las células huésped, allanando el camino para el desarrollo de terapias dirigidas contra el cáncer.

Lugar de metástasis
No aplicable (fibroblasto esplénico normal; inmortalizado con SV40)
Aplicaciones
Oncogénesis del SV40; biología de los supresores tumorales p53/Rb; regulación del ciclo celular; biología de los fibroblastos; biología del cáncer

02Clasificación

Organismo
Humano
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Tipo fibroblasto
Tipo de célula
Fibroblastos
Tiempo de duplicación
entre 24 y 36 horas, aproximadamente

04Identificadores

Referencia
HSF(SV40) (número de catálogo 305338 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Lavar con PBS, añadir Accutase (8-10 min a temperatura ambiente), resuspender, centrifugar a 300×g durante 3 min y volver a sembrar.
Relación de división
Del 1 al 3
Densidad de siembra
De 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.