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HSF(SV40)
Local da metástase
Não aplicável (fibroblasto esplénico normal; imortalizado com SV40)

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HSF(SV40)

Cell line · Número do produto 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular imortalizada HSF(SV40) refere-se a células que foram geneticamente modificadas para expressar o grande antigénio T (T-Ag) do vírus Simian 40 (SV40), o que facilita a imortalização celular. O SV40 T-Ag é uma oncoproteína potente que interage com proteínas supressoras de tumores essenciais, como a p53 e a proteína do retinoblastoma (Rb), levando à inativação das suas funções supressoras de tumores. Esta interação perturba os mecanismos normais de controlo do ciclo celular, permitindo que as células contornem a senescência e proliferem indefinidamente.

Devido à sua natureza imortalizada e ao envolvimento crítico do SV40 T-Ag na sua transformação, as células HSF(SV40) são amplamente utilizadas na investigação do cancro, particularmente em estudos relacionados com a oncogénese viral, a regulação do ciclo celular e as intervenções terapêuticas que visam as chaperones moleculares e as vias supressoras de tumores. A sua utilização fornece informações valiosas sobre a interação entre as oncoproteínas virais e as redes reguladoras das células hospedeiras, abrindo caminho para o desenvolvimento de terapias específicas contra o cancro.

Local da metástase
Não aplicável (fibroblasto esplénico normal; imortalizado com SV40)
Aplicações
Oncogénese do SV40; biologia dos supressores tumorais p53/Rb; regulação do ciclo celular; biologia dos fibroblastos; biologia do cancro

02Classificação

Organismo
Humano
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Tipo fibroblastos
Tipo de célula
Fibroblastos
Tempo de duplicação
aprox. 24 a 36 horas

04Identificadores

Referência
HSF(SV40) (número de catálogo Cytion 305338)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Lavar com PBS, adicionar Accutase (8–10 min à temperatura ambiente), ressuspender, centrifugar a 300×g durante 3 min e semear novamente.
Rácio de divisão
1 a 3
Densidade de sementeira
1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.