İçeriğe atla
HSF(SV40)
Metastaz yeri
Uygulanamaz (normal dalak fibroblasti; SV40 ile ölümsüzleştirilmiş)

HSF(SV40)

Cell line · Ürün numarası 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

HSF(SV40) immortalize hücre hattı, hücresel immortalizasyonu kolaylaştıran Simian Virüs 40 (SV40) büyük T-antijenini (T-Ag) ifade etmek üzere genetik olarak modifiye edilmiş hücreleri ifade eder. SV40 T-Ag, p53 ve retinoblastoma proteini (Rb) gibi kritik tümör baskılayıcı proteinlerle etkileşime girerek bu proteinlerin tümör baskılayıcı işlevlerinin inaktivasyonuna yol açan güçlü bir onkoproteindir. Bu etkileşim normal hücre döngüsü kontrol mekanizmalarını bozarak hücrelerin senesensi atlamasına ve süresiz olarak çoğalmasına izin verir.

Ölümsüzleştirilmiş doğaları ve dönüşümlerinde SV40 T-Ag'nin kritik katılımı nedeniyle, HSF (SV40) hücreleri kanser araştırmalarında, özellikle viral onkogenez, hücre döngüsü düzenlemesi ve moleküler şaperonları ve tümör baskılayıcı yolakları hedefleyen terapötik müdahalelerle ilgili çalışmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Bunların kullanımı, viral onkoproteinler ve konak hücre düzenleyici ağları arasındaki etkileşim hakkında değerli bilgiler sağlayarak hedefe yönelik kanser tedavilerinin geliştirilmesinin önünü açmaktadır.

Metastaz yeri
Uygulanamaz (normal dalak fibroblasti; SV40 ile ölümsüzleştirilmiş)
Uygulamalar
SV40 onkogenezi; p53/Rb tümör baskılayıcı biyolojisi; hücre döngüsü düzenlenmesi; fibroblast biyolojisi; kanser biyolojisi

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast benzeri
Hücre türü
Fibroblast
İki katına çıkma süresi
yaklaşık 24 ila 36 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HSF(SV40) (Cytion katalog numarası 305338)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
Not assigned

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
PBS ile yıkayın, Accutase ekleyin (oda sıcaklığında 8–10 dakika), yeniden süspansiyon haline getirin, 300×g’de 3 dakika santrifüjleyin, yeniden ekleyin.
Bölünme oranı
1'den 3'e kadar
Ekim yoğunluğu
1 ila 3 × 10⁴ hücre/cm²
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.