Przejdź do treści
HSF(SV40)
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (normalny fibroblast śledzionowy; unieśmiertelniony wirusem SV40)

Dokumenty

HSF(SV40)

Cell line · Numer produktu 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Immortalizowana linia komórkowa HSF(SV40) odnosi się do komórek, które zostały genetycznie zmodyfikowane w celu ekspresji dużego antygenu T (T-Ag) wirusa Simian Virus 40 (SV40), co ułatwia immortalizację komórkową. SV40 T-Ag jest silną onkoproteiną, która wchodzi w interakcje z krytycznymi białkami supresorowymi nowotworów, takimi jak p53 i białko retinoblastoma (Rb), prowadząc do inaktywacji ich funkcji supresorowych nowotworów. Interakcja ta zakłóca normalne mechanizmy kontroli cyklu komórkowego, umożliwiając komórkom ominięcie starzenia się i proliferację w nieskończoność.

Ze względu na ich nieśmiertelną naturę i krytyczny udział SV40 T-Ag w ich transformacji, komórki HSF(SV40) są szeroko stosowane w badaniach nad rakiem, szczególnie w badaniach związanych z onkogenezą wirusową, regulacją cyklu komórkowego i interwencjami terapeutycznymi ukierunkowanymi na chaperony molekularne i szlaki supresorowe nowotworów. Ich wykorzystanie zapewnia cenny wgląd w interakcję między wirusowymi onkoproteinami a sieciami regulacyjnymi komórek gospodarza, torując drogę do rozwoju ukierunkowanych terapii przeciwnowotworowych.

Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (normalny fibroblast śledzionowy; unieśmiertelniony wirusem SV40)
Zastosowania
Onkogeneza wirusa SV40; biologia supresorów nowotworowych p53/Rb; regulacja cyklu komórkowego; biologia fibroblastów; biologia nowotworów

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do fibroblastów
Typ komórki
Fibroblast
Czas podwojenia
ok. 24–36 godzin

04Identyfikatory

Źródło
HSF(SV40) (numer katalogowy Cytion 305338)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Przepłukać roztworem PBS, dodać Accutase (8–10 min w temperaturze pokojowej), ponownie zawiesić, odwirować przy 300×g przez 3 minuty, ponownie wysiać.
Współczynnik podziału
od 1 do 3
Gęstość wysiewu
od 1 do 3 × 10⁴ komórek/cm²
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.