Ga naar de inhoud
HSF(SV40)
Plaats van uitzaaiingen
Niet van toepassing (normale miltfibroblast; door SV40 onsterfelijk gemaakt)

Documenten

HSF(SV40)

Cell line · Productnummer 305338

The HSF(SV40) immortalized cell line refers to cells that have been genetically modified to express the Simian Virus 40 (SV40) large T-antigen (T-Ag), whi...

€1,500.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De HSF(SV40) geïmmortaliseerde cellijn verwijst naar cellen die genetisch zijn gemodificeerd om het grote T-antigeen (T-Ag) van het Simian Virus 40 (SV40) tot expressie te brengen, wat cellulaire immortalisatie vergemakkelijkt. SV40 T-Ag is een krachtig oncoproteïne dat een wisselwerking aangaat met cruciale tumorsuppressoreiwitten, zoals p53 en retinoblastoma-eiwit (Rb), waardoor hun tumorsuppressieve functies worden geïnactiveerd. Deze interactie verstoort de normale controlemechanismen van de celcyclus, waardoor cellen de senescentie kunnen omzeilen en zich onbeperkt kunnen vermenigvuldigen.

Vanwege hun geïmmortaliseerde aard en de cruciale betrokkenheid van SV40 T-Ag bij hun transformatie, worden HSF(SV40)-cellen veel gebruikt in kankeronderzoek, met name in onderzoeken naar virale oncogenese, celcyclusregulatie en therapeutische interventies gericht op moleculaire chaperones en tumorsuppressorpaden. Het gebruik van deze cellen biedt waardevolle inzichten in de wisselwerking tussen virale oncoproteïnen en regulerende netwerken van gastcellen, waardoor de weg wordt vrijgemaakt voor de ontwikkeling van doelgerichte kankertherapieën.

Plaats van uitzaaiingen
Niet van toepassing (normale miltfibroblast; door SV40 onsterfelijk gemaakt)
Toepassingen
SV40-oncogenese; biologie van de tumorsuppressorgenen p53 en Rb; regulering van de celcyclus; biologie van fibroblasten; kankerbiologie

02Classificatie

Organisme
Mens
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This HSF fibroblast line contains an SV40 T-antigen construct enabling immortalization for dermal and connective tissue studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast-achtige
Celtype
Fibroblast
Verdubbelingstijd
ongeveer 24 tot 36 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HSF(SV40) (Cytion catalogusnummer 305338)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Was met PBS, voeg Accutase toe (8–10 min bij kamertemperatuur), breng het mengsel weer in suspensie, centrifugeer bij 300×g gedurende 3 min, en zaai opnieuw uit.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 3
Zaaidichtheid
1 tot 3 × 10⁴ cellen/cm²
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.