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LS174T
Tissu
Colon
Maladie
Adénocarcinome
Synonymes
Ls174T, LS174t, Ls-174-T, LS-174-T, LS 174 T, LS174T, Ls-174T, LS 174T, LS-174, LS174

Documents

LS174T

Cell line · Référence du produit 300392

The LS147T cell line is a variant of LS-180, both of which are derived from a Duke's type B adenocarcinoma of the colon in a 58-year-old White female pati...

€430.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire LS147T est une variante de la lignée LS-180, toutes deux dérivées d'un adénocarcinome du côlon de type B de Duke chez une femme blanche de 58 ans. La lignée LS-180 originale a été établie en cultivant le tissu tumoral haché pendant 10 mois. LS-147T, tout comme sa lignée mère, se distingue par l'expression de plusieurs oncogènes, notamment myc, myb, ras et fos, alors qu'elle est négative pour d'autres comme sis, abl et ros. Cette lignée exprime également des niveaux élevés d'antigène carcinoembryonnaire (CEA), d'interleukine 6 (IL-6) et d'interleukine 10 (IL-10), qui sont des marqueurs importants et des cibles potentielles dans la recherche sur le cancer colorectal.

Ces cellules présentent plusieurs caractéristiques clés des cellules épithéliales coliques, notamment des microvillosités abondantes et des vacuoles de mucine intracytoplasmiques, qui sont des caractéristiques typiquement associées aux cellules sécrétoires de la muqueuse colique. Des études en microscopie électronique ont confirmé ces détails structurels, ce qui confirme leur origine et leur statut de différenciation. Il est important de noter que les cellules LS-147T se sont révélées tumorigènes chez des souris immunodéprimées, produisant systématiquement des tumeurs lorsqu'elles sont inoculées par voie sous-cutanée à des densités cellulaires élevées, ce qui confirme leur potentiel malin.

En outre, la lignée cellulaire LS-147T est particulièrement précieuse pour les études portant sur les aspects moléculaires et immunologiques du cancer colorectal. Il a été rapporté que cette lignée est plus facile à sous-cultiver que sa lignée mère, LS-180, ce qui en fait un choix plus pratique pour les études à long terme. La forte production de CEA par ces cellules, qui est significativement plus élevée que celle d'autres lignées établies comme HT-29, fait de LS-147T un modèle essentiel pour comprendre la dynamique des marqueurs tumoraux et explorer les thérapies ciblées dans le cancer colorectal.

Tissu
Colon
Maladie
Adénocarcinome
Synonymes
  • Ls174T
  • LS174t
  • Ls-174-T
  • LS-174-T
  • LS 174 T
  • LS174T
  • Ls-174T
  • LS 174T
  • LS-174
  • LS174

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Tumorigène
Oui, sur des souris nues
Caryotype
45,x avec un chromosome x manquant mais sans autres aberrations chromosomiques

04Identifiants

Référence
LS174T (numéro de catalogue Cytion 300392)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1384

05Expression et sensibilité

Expression des protéines
Colon Antigen 3 +, CEA +, p53 -, GFAP -, expression de l'ARNm +
Expression des antigènes
HLA A2, B13, B50, groupe sanguin O
Isoenzymes
ADA, 1 : G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1
Oncogènes
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Profil mutationnel
Les cellules LS-174T sont porteuses d'une mutation dans le codon 12 du gène Kras : GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
Transcriptase inverse
Négatif
Produits
Antigène carcinoembryonnaire (CEA) 1944 ng/106 cellules en 10 jours, mucine, interleukine-10 (IL-10), interleukine-6 (IL-6)

06Manipulation et culture

Milieu de culture
EMEM (MEM Eagle), w : 2 mM L-Glutamine, w : 2.2 g/L NaHCO3, w : EBSS (numéro d'article Cytion 820100a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS et 1 % de NEAA
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
5 à 8 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
58 ans
Origine ethnique
Caucasien