Langsung ke isi
LS174T
Tisu
Usus besar
Penyakit
Adenokarsinoma
Sinonim
Ls174T, LS174t, Ls-174-T, LS-174-T, LS 174 T, LS174T, Ls-174T, LS 174T, LS-174, LS174

Dokumen

LS174T

Cell line · Nomor produk 300392

The LS147T cell line is a variant of LS-180, both of which are derived from a Duke's type B adenocarcinoma of the colon in a 58-year-old White female pati...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel LS147T adalah varian dari LS-180, yang keduanya berasal dari adenokarsinoma usus besar tipe B Duke pada pasien wanita kulit putih berusia 58 tahun. Garis LS-180 yang asli dibuat dengan membiakkan jaringan tumor cincang selama 10 bulan. LS-147T, bersama dengan garis induknya, terkenal karena ekspresi beberapa onkogen termasuk myc, myb, ras, dan fos, sementara negatif untuk yang lain seperti sis, abl, dan ros. Jalur ini juga mengekspresikan carcinoembryonic antigen (CEA), interleukin 6 (IL-6), dan interleukin 10 (IL-10) tingkat tinggi, yang merupakan penanda penting dan target potensial dalam penelitian kanker kolorektal.

Sel-sel ini menunjukkan beberapa karakteristik utama sel epitel kolon, termasuk mikrovili yang melimpah dan vakuola musin intraseluler, yang merupakan ciri-ciri yang biasanya terkait dengan sel sekretori dalam mukosa kolon. Studi mikroskop elektron telah mengkonfirmasi rincian struktural ini, yang selanjutnya mendukung asal-usul dan status diferensiasinya. Yang penting, sel LS-147T telah terbukti bersifat tumorigenik pada tikus yang kekurangan imun, secara konsisten menghasilkan tumor ketika diinokulasi secara subkutan dengan kepadatan sel yang tinggi, sehingga menegaskan potensi ganasnya.

Selain itu, garis sel LS-147T sangat berharga dalam penelitian yang berfokus pada aspek molekuler dan imunologi kanker kolorektal. Telah dilaporkan bahwa lini ini lebih mudah untuk disubkultur dibandingkan dengan lini induknya, LS-180, menjadikannya pilihan yang lebih praktis untuk studi jangka panjang. Produksi CEA yang kuat oleh sel-sel ini, yang secara signifikan lebih tinggi daripada lini lain yang sudah mapan seperti HT-29, menjadikan LS-147T sebagai model penting untuk memahami dinamika penanda tumor dan mengeksplorasi terapi yang ditargetkan pada kanker kolorektal.

Tisu
Usus besar
Penyakit
Adenokarsinoma
Sinonim
  • Ls174T
  • LS174t
  • Ls-174-T
  • LS-174-T
  • LS 174 T
  • LS174T
  • Ls-174T
  • LS 174T
  • LS-174
  • LS174

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Tumorigenik
Ya, pada tikus telanjang
Kariotipe
45,x dengan satu kromosom x yang hilang tetapi tidak ada kelainan kromosom lainnya

04Pengidentifikasi

Referensi
LS174T (Nomor katalog Cytion 300392)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1384

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi protein
Antigen Kolon 3 +, CEA +, p53 -, GFAP -, ekspresi mRNA +
Ekspresi antigen
HLA A2, B13, B50, Golongan darah O
Isoenzim
ADA, 1: G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1
Onkogen
Myc +, myb +, ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Profil mutasi
Sel LS-174T membawa mutasi pada kodon 12 gen Kras: GGT (Wt Gly)>GAT (Asp)
Transkriptase balik
Negatif
Produk
Carcinoembryonic antigen (CEA) 1944 ng/106 sel dalam 10 hari, mucin, interleukin-10 (IL-10), interleukin-6 (IL-6)

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820100a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS dan 1% NEAA
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Kepadatan penanaman
5 hingga 8 x 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan
Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 x 10⁴ sel/cm² dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan serta menempel setidaknya selama 24 jam.
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
58 tahun
Etnis
Kaukasia