Mine otse sisu juurde
LS174T
Kude
Colon
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
Ls174T, LS174t, Ls-174-T, LS-174-T, LS 174 T, LS174T, Ls-174T, LS 174T, LS-174, LS174

Dokumendid

LS174T

Cell line · Toote number 300392

The LS147T cell line is a variant of LS-180, both of which are derived from a Duke's type B adenocarcinoma of the colon in a 58-year-old White female pati...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

LS147T rakuliin on LS-180 variant, mis mõlemad on saadud 58-aastase valge naissoost patsiendi Duke'i B-tüüpi käärsoole adenokartsinoomist. Esialgne LS-180 liin loodi, kultiveerides peenestatud kasvajakude 10 kuud. LS-147T, nagu ka selle vanemliin, paistab silma mitme onkogeeni, sealhulgas myc, myb, ras ja fos ekspressiooni poolest, olles samas negatiivne teiste, nagu sis, abl ja ros, suhtes. See liin ekspresseerib ka kartsinoembrüoantigeeni (CEA), interleukiin 6 (IL-6) ja interleukiin 10 (IL-10), mis on olulised markerid ja potentsiaalsed sihtmärgid kolorektaalvähi uurimisel.

Nendel rakkudel on mitu põhilist jämesoole epiteelirakkude tunnust, sealhulgas rohked mikrovillid ja intratsütoplasmased mukiinivakuaarid, mis on tüüpiliselt seotud jämesoole limaskesta sekretoriliste rakkudega. Elektronmikroskoopiauuringud on kinnitanud neid struktuurilisi üksikasju, mis toetab veelgi nende päritolu ja diferentseerumist. Oluline on see, et LS-147T rakud on immuunpuudulikkusega hiirtel näidanud, et nad on kasvajalised, tekitades järjekindlalt kasvajaid, kui neid vaktsineeritakse subkutaanselt suure rakutihedusega, kinnitades seega nende pahaloomulist potentsiaali.

Lisaks on LS-147T rakuliin eriti väärtuslik uuringutes, mis keskenduvad kolorektaalse vähi molekulaarsetele ja immunoloogilistele aspektidele. On teatatud, et seda liini on lihtsam subkultuurida võrreldes selle vanemliini LS-180-ga, mis muudab selle praktilisemaks valikuks pikaajaliste uuringute jaoks. Nende rakkude tugev CEA tootmine, mis on oluliselt suurem kui teistel väljakujunenud liinidel, nagu HT-29, muudab LS-147T kriitiliseks mudeliks kasvajamarkerite dünaamika mõistmiseks ja sihtotstarbeliste ravimeetodite uurimiseks kolorektaalvähi puhul.

Kude
Colon
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
  • Ls174T
  • LS174t
  • Ls-174-T
  • LS-174-T
  • LS 174 T
  • LS174T
  • Ls-174T
  • LS 174T
  • LS-174
  • LS174

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel
Karyotüüp
45,x, kus üks x-kromosoom puudub, kuid ei ole muid kromosoomiaberratsioone

04Tunnused

Viide
LS174T (Cytioni katalooginumber 300392)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1384

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Colon Antigen 3 +, CEA +, p53 -, GFAP -, mRNA ekspressioon +
Antigeeni ekspressioon
HLA A2, B13, B50, veregrupp O
Isoensüümid
ADA, 1: G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1
Onkogeenid
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutatsiooniprofiil
LS-174T rakud kannavad mutatsiooni Kras'i geeni 12. koodonis: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
Pöördtranskriptaas
Negatiivne
Tooted
Kartsinoembrüonaalne antigeen (CEA) 1944 ng/106 rakku 10 päeva jooksul, mukiin, interleukiin-10 (IL-10), interleukiin-6 (IL-6)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
5 kuni 8 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
58 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia