
- Doku
- Kolon
- Hastalık
- Adenokarsinom
- Eş anlamlılar
- Ls174T, LS174t, Ls-174-T, LS-174-T, LS 174 T, LS174T, Ls-174T, LS 174T, LS-174, LS174
Belgeler
LS174T
Cell line · Ürün numarası 300392
The LS147T cell line is a variant of LS-180, both of which are derived from a Duke's type B adenocarcinoma of the colon in a 58-year-old White female pati...
Kişiselleştirme / Öneriler
- LS174TCell line€430.00
Önerilen (en taze parti)
01Genel bilgiler
- Açıklama
LS147T hücre hattı LS-180'in bir varyantıdır ve her ikisi de 58 yaşında Beyaz bir kadın hastada kolonun Duke B tipi adenokarsinomundan türetilmiştir. Orijinal LS-180 hattı, kıyılmış tümör dokusunun 10 ay boyunca kültüre edilmesiyle oluşturulmuştur. LS-147T, ana hattı ile birlikte, sis, abl ve ros gibi diğerleri için negatif iken myc, myb, ras ve fos dahil olmak üzere çoklu onkogenleri eksprese etmesiyle dikkat çekmektedir. Bu hat aynı zamanda kolorektal kanser araştırmalarında önemli belirteçler ve potansiyel hedefler olan yüksek düzeyde karsinoembriyonik antijen (CEA), interlökin 6 (IL-6) ve interlökin 10 (IL-10) eksprese etmektedir.
Bu hücreler, tipik olarak kolon mukozasındaki salgı hücreleriyle ilişkili özellikler olan bol mikrovillus ve intrasitoplazmik müsin vakuolleri dahil olmak üzere kolon epitel hücrelerinin birkaç temel özelliğini sergilemektedir. Elektron mikroskobu çalışmaları bu yapısal ayrıntıları doğrulayarak kökenlerini ve farklılaşma durumlarını daha da desteklemiştir. Daha da önemlisi, LS-147T hücrelerinin bağışıklık sistemi baskılanmış farelerde tümörijenik olduğu ve yüksek hücre yoğunluklarında deri altına aşılandığında sürekli olarak tümör ürettiği gösterilmiş, böylece kötü huylu potansiyelleri teyit edilmiştir.
Ayrıca LS-147T hücre hattı, kolorektal kanserin moleküler ve immünolojik yönlerine odaklanan çalışmalarda özellikle değerlidir. Bu hattın, ana hattı olan LS-180'e kıyasla daha kolay alt kültüre alınabildiği ve uzun vadeli çalışmalar için daha pratik bir seçim olduğu bildirilmiştir. Bu hücreler tarafından CEA'nın HT-29 gibi diğer yerleşik hatlardan önemli ölçüde daha yüksek olan güçlü üretimi, LS-147T'yi tümör belirteç dinamiklerini anlamak ve kolorektal kanserde hedefe yönelik tedavileri araştırmak için kritik bir model haline getirmektedir.
- Doku
- Kolon
- Hastalık
- Adenokarsinom
- Eş anlamlılar
- Ls174T
- LS174t
- Ls-174-T
- LS-174-T
- LS 174 T
- LS174T
- Ls-174T
- LS 174T
- LS-174
- LS174
02Sınıflandırma
- Canlı
- İnsan
- Cinsiyet
- Kadın
- Büyüme özellikleri
- Bağlı
- Biyogüvenlik seviyesi
- 1
03Özellikler
- Morfoloji
- Epitel benzeri
- Tümör oluşturucu
- Evet, çıplak farelerde
- Karyotip
- 45,x bir x kromozomu eksik ancak başka kromozomal sapma yok
04Tanımlayıcılar
- Kaynak gösterimi
- LS174T (Cytion katalog numarası 300392)
- NCBI Vergi Kimlik Numarası
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1384
05İfade ve duyarlılık
- Protein ekspresyonu
- Kolon Antijeni 3 +, CEA +, p53 -, GFAP -, mRNA ekspresyonu +
- Antijen ekspresyonu
- HLA A2, B13, B50, Kan grubu O
- İzoenzimler
- ADA, 1: G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1
- Onkogenler
- Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
- Mutasyon profili
- LS-174T hücreleri Kras geninin 12. kodonunda bir mutasyon taşımaktadır: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
- Ters transkriptaz
- Negatif
- Ürünler
- Karsinoembriyonik antijen (CEA) 10 günde 1944 ng/106 hücre, müsin, interlökin-10 (IL-10), interlökin-6 (IL-6)
06İşleme ve yetiştirme
- Besiyeri
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
- Kuluçka ortamı
37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.
- Takviyeler
- Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
- Ayrıştırma reaktifi
- Accutase
- Alt kültür oluşturma
- Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
- Ekim yoğunluğu
- 5 ila 8 x 104 hücre/cm2
- Sıvı değişimi
- haftada 2 ila 3 kez
- Çözülme sonrası toparlanma
- Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
- Çözme ve kültürleme
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon
- Kısırlık
Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.
Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.
- Dondurma ortamı
- Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
- Saklama koşulları
Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.
- Nakliye koşulları
Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.
08Bağışçı
- Bağışçının yaşı
- 58 yıl
- Etnik köken
- Kafkas
09Yasal ve güvenlik
- Güvenlik önlemleri
- İleride çözdürmek üzere sıvı nitrojen içinde bir kriyoviyal saklamayı planlarken, sıkı güvenlik önlemlerine uymak zorunludur. Uygun koruyucu eldivenler ve giysiler şarttır ve dondurulmuş numunelerin sıvı nitrojen tankına veya tanktan transferi sırasında yüz maskesi veya koruyucu gözlük kullanılması gerekir. Bu, çıkarma sırasında keskin parçaların fırlamasına neden olabilecek potansiyel kriyoviyal patlamalardan kaynaklanan yaralanma riskini azaltmak içindir.
- Garanti
Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz
Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın
- Malzeme Transfer Anlaşması gereklidir
- Evet