İçeriğe atla
LS174T
Doku
Kolon
Hastalık
Adenokarsinom
Eş anlamlılar
Ls174T, LS174t, Ls-174-T, LS-174-T, LS 174 T, LS174T, Ls-174T, LS 174T, LS-174, LS174

LS174T

Cell line · Ürün numarası 300392

The LS147T cell line is a variant of LS-180, both of which are derived from a Duke's type B adenocarcinoma of the colon in a 58-year-old White female pati...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

LS147T hücre hattı LS-180'in bir varyantıdır ve her ikisi de 58 yaşında Beyaz bir kadın hastada kolonun Duke B tipi adenokarsinomundan türetilmiştir. Orijinal LS-180 hattı, kıyılmış tümör dokusunun 10 ay boyunca kültüre edilmesiyle oluşturulmuştur. LS-147T, ana hattı ile birlikte, sis, abl ve ros gibi diğerleri için negatif iken myc, myb, ras ve fos dahil olmak üzere çoklu onkogenleri eksprese etmesiyle dikkat çekmektedir. Bu hat aynı zamanda kolorektal kanser araştırmalarında önemli belirteçler ve potansiyel hedefler olan yüksek düzeyde karsinoembriyonik antijen (CEA), interlökin 6 (IL-6) ve interlökin 10 (IL-10) eksprese etmektedir.

Bu hücreler, tipik olarak kolon mukozasındaki salgı hücreleriyle ilişkili özellikler olan bol mikrovillus ve intrasitoplazmik müsin vakuolleri dahil olmak üzere kolon epitel hücrelerinin birkaç temel özelliğini sergilemektedir. Elektron mikroskobu çalışmaları bu yapısal ayrıntıları doğrulayarak kökenlerini ve farklılaşma durumlarını daha da desteklemiştir. Daha da önemlisi, LS-147T hücrelerinin bağışıklık sistemi baskılanmış farelerde tümörijenik olduğu ve yüksek hücre yoğunluklarında deri altına aşılandığında sürekli olarak tümör ürettiği gösterilmiş, böylece kötü huylu potansiyelleri teyit edilmiştir.

Ayrıca LS-147T hücre hattı, kolorektal kanserin moleküler ve immünolojik yönlerine odaklanan çalışmalarda özellikle değerlidir. Bu hattın, ana hattı olan LS-180'e kıyasla daha kolay alt kültüre alınabildiği ve uzun vadeli çalışmalar için daha pratik bir seçim olduğu bildirilmiştir. Bu hücreler tarafından CEA'nın HT-29 gibi diğer yerleşik hatlardan önemli ölçüde daha yüksek olan güçlü üretimi, LS-147T'yi tümör belirteç dinamiklerini anlamak ve kolorektal kanserde hedefe yönelik tedavileri araştırmak için kritik bir model haline getirmektedir.

Doku
Kolon
Hastalık
Adenokarsinom
Eş anlamlılar
  • Ls174T
  • LS174t
  • Ls-174-T
  • LS-174-T
  • LS 174 T
  • LS174T
  • Ls-174T
  • LS 174T
  • LS-174
  • LS174

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde
Karyotip
45,x bir x kromozomu eksik ancak başka kromozomal sapma yok

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
LS174T (Cytion katalog numarası 300392)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1384

05İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
Kolon Antijeni 3 +, CEA +, p53 -, GFAP -, mRNA ekspresyonu +
Antijen ekspresyonu
HLA A2, B13, B50, Kan grubu O
İzoenzimler
ADA, 1: G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1
Onkogenler
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutasyon profili
LS-174T hücreleri Kras geninin 12. kodonunda bir mutasyon taşımaktadır: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
Ters transkriptaz
Negatif
Ürünler
Karsinoembriyonik antijen (CEA) 10 günde 1944 ng/106 hücre, müsin, interlökin-10 (IL-10), interlökin-6 (IL-6)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
5 ila 8 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
58 yıl
Etnik köken
Kafkas