Gå direkte til indholdet
LS174T
Væv
Tarm
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
Ls174T, LS174t, Ls-174-T, LS-174-T, LS 174 T, LS174T, Ls-174T, LS 174T, LS-174, LS174

Dokumenter

LS174T

Cell line · Varenummer 300392

The LS147T cell line is a variant of LS-180, both of which are derived from a Duke's type B adenocarcinoma of the colon in a 58-year-old White female pati...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

LS147T-cellelinjen er en variant af LS-180, som begge stammer fra et Duke's type B adenokarcinom i tyktarmen hos en 58-årig hvid kvindelig patient. Den oprindelige LS-180-linje blev etableret ved at dyrke det hakkede tumorvæv i 10 måneder. LS-147T er sammen med sin moderlinje bemærkelsesværdig for sit udtryk for flere onkogener, herunder myc, myb, ras og fos, mens den er negativ for andre som sis, abl og ros. Denne linje udtrykker også høje niveauer af carcinoembryonalt antigen (CEA), interleukin 6 (IL-6) og interleukin 10 (IL-10), som er vigtige markører og potentielle mål for forskning i kolorektal cancer.

Disse celler udviser flere nøglekarakteristika for kolonepitelceller, herunder rigelige mikrovilli og intracytoplasmatiske mucinvakuoler, som er træk, der typisk forbindes med sekretoriske celler i kolonslimhinden. Elektronmikroskopiske undersøgelser har bekræftet disse strukturelle detaljer, hvilket yderligere understøtter deres oprindelse og differentieringsstatus. Det er vigtigt at bemærke, at LS-147T-celler har vist sig at være tumorigeniske i immundepriverede mus og konsekvent producerer tumorer, når de inokuleres subkutant i høje celletætheder, hvilket bekræfter deres maligne potentiale.

Desuden er LS-147T-cellelinjen særlig værdifuld i undersøgelser, der fokuserer på de molekylære og immunologiske aspekter af kolorektal cancer. Det er blevet rapporteret, at denne linje er lettere at subkultivere sammenlignet med sin moderlinje, LS-180, hvilket gør den til et mere praktisk valg til langtidsstudier. Den robuste produktion af CEA i disse celler, som er betydeligt højere end i andre etablerede linjer som HT-29, gør LS-147T til en vigtig model til at forstå tumormarkørdynamik og udforske målrettede terapier i kolorektal cancer.

Væv
Tarm
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
  • Ls174T
  • LS174t
  • Ls-174-T
  • LS-174-T
  • LS 174 T
  • LS174T
  • Ls-174T
  • LS 174T
  • LS-174
  • LS174

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus
Karyotype
45,x med et manglende x-kromosom, men ingen andre kromosomafvigelser

04Identifikatorer

Kildehenvisning
LS174T (Cytion katalognummer 300392)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1384

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
Colon Antigen 3 +, CEA +, p53 -, GFAP -, mRNA-ekspression +
Antigenudtryk
HLA A2, B13, B50, blodtype O
Isoenzymer
ADA, 1: G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1
Onkogener
Myc +, myb +, ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Mutationsprofil
LS-174T-celler bærer en mutation i kodon 12 i Kras-genet: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
Revers transkriptase
Negativ
Produkter
Carcinoembryonalt antigen (CEA) 1944 ng/106 celler i 10 dage, mucin, interleukin-10 (IL-10), interleukin-6 (IL-6)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
5 til 8 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
58 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk