Tartalomra ugrás
LS174T
Szövet
Vastagbél
Betegség
Adenokarcinóma
Szinonimák
Ls174T, LS174t, Ls-174-T, LS-174-T, LS 174 T, LS174T, Ls-174T, LS 174T, LS-174, LS174

Dokumentumok

LS174T

Cell line · Termékszám 300392

The LS147T cell line is a variant of LS-180, both of which are derived from a Duke's type B adenocarcinoma of the colon in a 58-year-old White female pati...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az LS147T sejtvonal az LS-180 egy változata, mindkettő egy 58 éves fehér nőbeteg B típusú Duke-féle vastagbél adenokarcinómájából származik. Az eredeti LS-180-as vonalat a darált tumorszövet 10 hónapos tenyésztésével hozták létre. Az LS-147T, a szülővonalával együtt, több onkogén, köztük a myc, myb, ras és fos expressziójával tűnik ki, míg másokra, mint a sis, abl és ros, negatív. Ez a vonal magas szinten expresszálja a karcinoembryonális antigént (CEA), az interleukin 6 (IL-6) és az interleukin 10 (IL-10), amelyek fontos markerek és potenciális célpontok a vastagbélrák kutatásában.

Ezek a sejtek a vastagbél epitélsejtek számos kulcsfontosságú jellemzőjét mutatják, beleértve a bőséges mikrovillákat és az intracitoplazmatikus mucin-vakuolumokat, amelyek jellemzően a vastagbél nyálkahártyájának szekréciós sejtjeihez társított jellemzők. Elektronmikroszkópos vizsgálatok megerősítették ezeket a szerkezeti részleteket, ami tovább erősíti eredetüket és differenciálódási státuszukat. Fontos, hogy az LS-147T sejtek immunhiányos egerekben tumorogénnek bizonyultak, és nagy sejtsűrűségű szubkután beoltáskor következetesen tumorokat termeltek, ami megerősíti rosszindulatú potenciáljukat.

Az LS-147T sejtvonal továbbá különösen értékes a vastagbélrák molekuláris és immunológiai aspektusait vizsgáló vizsgálatokban. Jelentések szerint ez a vonal könnyebben szubkultúrázható, mint az LS-180-as szülővonal, így praktikusabb választás a hosszú távú vizsgálatokhoz. A CEA e sejtek általi erőteljes termelése, amely jelentősen magasabb, mint más bevált vonalaké, például a HT-29-é, az LS-147T-t kritikus modellé teszi a tumormarkerek dinamikájának megértéséhez és a vastagbélrák célzott terápiáinak feltárásához.

Szövet
Vastagbél
Betegség
Adenokarcinóma
Szinonimák
  • Ls174T
  • LS174t
  • Ls-174-T
  • LS-174-T
  • LS 174 T
  • LS174T
  • Ls-174T
  • LS 174T
  • LS-174
  • LS174

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Igen, meztelen egerekben
Kariotípus
45,x egy x kromoszóma hiányzik, de nincs más kromoszóma-rendellenesség

04Azonosítók

Hivatkozás
LS174T (Cytion katalógusszám: 300392)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1384

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió
Colon Antigen 3 +, CEA +, p53 -, GFAP -, mRNS expresszió +
Antigén-expresszió
HLA A2, B13, B50, O vércsoport
Izoenzimek
ADA, 1: G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1
Onkogének
Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -, src -
Mutációs profil
Az LS-174T sejtek mutációt hordoznak a Kras gén 12-es kodonjában: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
Fordított transzkriptáz
Negatív
Termékek
Karcinoembrionális antigén (CEA) 1944 ng/106 sejt 10 nap alatt, mucin, interleukin-10 (IL-10), interleukin-6 (IL-6)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
5–8 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
58 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi