Перейти до вмісту
LS174T
Тканина
Двоєточие
Хвороба
Аденокарцинома
Синоніми
Ls174T, LS174t, Ls-174-T, LS-174-T, LS 174 T, LS174T, Ls-174T, LS 174T, LS-174, LS174

Документи

LS174T

Cell line · Номер товару 300392

The LS147T cell line is a variant of LS-180, both of which are derived from a Duke's type B adenocarcinoma of the colon in a 58-year-old White female pati...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія LS147T є варіантом лінії LS-180, обидві лінії отримані з аденокарциноми товстої кишки типу В Дьюка у 58-річної білої пацієнтки. Оригінальна лінія LS-180 була створена шляхом культивування подрібненої пухлинної тканини протягом 10 місяців. LS-147T, як і її батьківська лінія, відрізняється експресією багатьох онкогенів, включаючи myc, myb, ras і fos, але є негативною до інших, таких як sis, abl і ros. Ця лінія також експресує високі рівні карциноембріонального антигену (CEA), інтерлейкіну 6 (IL-6) та інтерлейкіну 10 (IL-10), які є важливими маркерами і потенційними мішенями в дослідженнях колоректального раку.

Ці клітини мають кілька ключових характеристик епітеліальних клітин товстої кишки, включаючи рясні мікроворсинки та інтрацитоплазматичні муцинові вакуолі, які зазвичай асоціюються з секреторними клітинами слизової оболонки товстої кишки. Електронно-мікроскопічні дослідження підтвердили ці структурні деталі, додатково підтвердивши їх походження та статус диференціювання. Важливо, що клітини LS-147T виявилися туморогенними у мишей з імунодефіцитом, постійно утворюючи пухлини при підшкірному введенні з високою щільністю клітин, що підтверджує їх злоякісний потенціал.

Крім того, клітинна лінія LS-147T є особливо цінною в дослідженнях, що зосереджені на молекулярних та імунологічних аспектах колоректального раку. Повідомляється, що цю лінію легше субкультивувати порівняно з її батьківською лінією LS-180, що робить її більш практичним вибором для довгострокових досліджень. Потужна продукція СЕА цими клітинами, яка значно вища, ніж у інших відомих ліній, таких як HT-29, робить LS-147T критично важливою моделлю для розуміння динаміки пухлинних маркерів і вивчення таргетованої терапії колоректального раку.

Тканина
Двоєточие
Хвороба
Аденокарцинома
Синоніми
  • Ls174T
  • LS174t
  • Ls-174-T
  • LS-174-T
  • LS 174 T
  • LS174T
  • Ls-174T
  • LS 174T
  • LS-174
  • LS174

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Пухлиноутворювальний
Так, у голих мишей
Каріотип
45,x з відсутністю однієї Х-хромосоми, але без інших хромосомних аберацій

04Ідентифікатори

Посилання
LS174T (номер за каталогом Cytion 300392)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_1384

05Експресія та сприйнятливість

Експресія білків
Антиген товстої кишки 3 +, CEA +, p53 -, GFAP -, експресія мРНК +
Експресія антигену
HLA A2, B13, B50, група крові O
Ізоферменти
ADA, 1: G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1
Онкогени
Myc +, myb +, ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
Профіль мутацій
Клітини LS-174T несуть мутацію в кодоні 12 гена Kras: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
Зворотна транскриптаза
Негативно
Продукція
Карциноембріональний антиген (СЕА) 1944 нг/106 клітин через 10 днів, муцин, інтерлейкін-10 (IL-10), інтерлейкін-6 (IL-6)

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS та 1% NEAA
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
Від 5 до 8 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 x 104 клітин/см2 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування та прикріпитися протягом щонайменше 24 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
58 років
Етнічна приналежність
Кавказець