
- Kudos
- Paksusuoli
- Sairaus
- Adenokarsinooma
- Synonyymit
- Ls174T, LS174t, Ls-174-T, LS-174-T, LS 174 T, LS174T, Ls-174T, LS 174T, LS-174, LS174
Asiakirjat
LS174T
Cell line · Tuotenumero 300392
The LS147T cell line is a variant of LS-180, both of which are derived from a Duke's type B adenocarcinoma of the colon in a 58-year-old White female pati...
Räätälöinti / Suositukset
- LS174TCell line€430.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
LS147T-solulinja on LS-180:n muunnos, ja molemmat solulinjat ovat peräisin 58-vuotiaan valkoihoisen naispotilaan paksusuolen B-tyypin adenokarsinoomasta. Alkuperäinen LS-180-solulinja perustettiin viljelemällä jauhettua kasvainkudosta 10 kuukauden ajan. LS-147T:n ja sen kantalinjan erityispiirteenä on useiden onkogeenien, kuten myc, myb, ras ja fos, ilmentyminen, kun taas muiden, kuten sis, abl ja ros, ilmentyminen on negatiivista. Tämä linja ilmentää myös runsaasti karsinoembryonista antigeenia (CEA), interleukiini 6:ta (IL-6) ja interleukiini 10:tä (IL-10), jotka ovat tärkeitä merkkiaineita ja potentiaalisia kohteita paksusuolisyövän tutkimuksessa.
Näillä soluilla on useita paksusuolen epiteelisolujen keskeisiä piirteitä, kuten runsaasti mikrovilloja ja sytoplasman sisäisiä mukiinityhjiöitä, jotka tyypillisesti liittyvät paksusuolen limakalvon erittäviin soluihin. Elektronimikroskooppitutkimukset ovat vahvistaneet nämä rakenteelliset yksityiskohdat, mikä tukee entisestään niiden alkuperää ja erilaistumista. Tärkeää on, että LS-147T-solujen on osoitettu olevan kasvaimia aiheuttavia immuunipuutteisilla hiirillä, ja ne tuottavat jatkuvasti kasvaimia, kun niitä inokuloidaan ihon alle suurilla solutiheyksillä, mikä vahvistaa niiden pahanlaatuisen potentiaalin.
Lisäksi LS-147T-solulinja on erityisen arvokas tutkimuksissa, joissa keskitytään kolorektaalisyövän molekulaarisiin ja immunologisiin näkökohtiin. On raportoitu, että tätä linjaa on helpompi subkulturoida verrattuna sen emolinjaan LS-180:een, mikä tekee siitä käytännöllisemmän valinnan pitkäaikaistutkimuksiin. Näiden solujen voimakas CEA-tuotanto, joka on huomattavasti suurempi kuin muilla vakiintuneilla linjoilla, kuten HT-29:llä, tekee LS-147T:stä ratkaisevan tärkeän mallin kasvainmerkkien dynamiikan ymmärtämisessä ja paksusuolen ja peräsuolen syövän kohdennettujen hoitojen tutkimisessa.
- Kudos
- Paksusuoli
- Sairaus
- Adenokarsinooma
- Synonyymit
- Ls174T
- LS174t
- Ls-174-T
- LS-174-T
- LS 174 T
- LS174T
- Ls-174T
- LS 174T
- LS-174
- LS174
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Nainen
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteelin kaltainen
- Kasvaimia aiheuttava
- Kyllä, alastomilla hiirillä
- Karyotyyppi
- 45,x, jossa yksi x-kromosomi puuttuu, mutta ei muita kromosomipoikkeavuuksia
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- LS174T (Cytionin luettelonumero 300392)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1384
05Ilmentyminen ja alttius
- Proteiinin ilmentyminen
- Paksusuolen antigeeni 3 +, CEA +, p53 -, GFAP -, mRNA-ekspressio +
- Antigeenin ilmentyminen
- HLA A2, B13, B50, veriryhmä O
- Isoentsyymit
- ADA, 1: G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, PGD, A, ES-D, 1, PEP-D, 1
- Onkogeenit
- Myc +, myb + , ras +, fos +, p53 +, sis -, abl -, ros -, src -
- Mutaatioprofiili
- LS-174T-soluissa on mutaatio Kras-geenin koodonissa 12: GGT(Wt Gly) >GAT(Asp)
- Käänteiskopioijaentsyymi
- Negatiivinen
- Tuotteet
- Karsinoembryoninen antigeeni (CEA) 1944 ng/106 solua 10 päivässä, mukiini, interleukiini-10 (IL-10), interleukiini-6 (IL-6)
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Kylvötiheys
- 5–8 x 104 solua/cm2
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulamisen jälkeinen palautuminen
- Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 58 vuotta
- Etnisyys
- Kaukasialainen
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä